Cary 3500 多池紫外-可見(jiàn)分光光度計(jì)用于蛋白質(zhì)分析的優(yōu)勢(shì)

紫外-可見(jiàn)分光光度計(jì)測(cè)量為樣品的質(zhì)量控制檢查提供了一種快速可靠的方法。它們 還可用于計(jì)算比活性或估算純化后的產(chǎn)率，并鑒定含有蛋白質(zhì)和氨基酸的組分。

含有芳香側(cè)鏈氨基酸的蛋白質(zhì)，在接近 280 nm 處產(chǎn)生吸收。因此可以使用紫外-可 見(jiàn)分光光度計(jì)進(jìn)行定量分析。當(dāng)吸收系數(shù)已知時(shí)，可根據(jù)比爾-朗伯定律 (1) 確定含 有這些氨基酸的蛋白質(zhì)的濃度。通常蛋白質(zhì)的樣品量有限，以少體積進(jìn)行測(cè)量對(duì) 于樣品的保存至關(guān)重要。通過(guò)波長(zhǎng)掃描可提供潛在污染物的信息。

Cary 3500 多池紫外-可見(jiàn)分光光度計(jì)具有光學(xué)準(zhǔn)直的集成式多池支架，與超微 量比色皿（圖 1）配合使用，非常適用于可靠且可重現(xiàn)的定性及定量測(cè)量。

為證明重現(xiàn)性，用超微量比色皿 (70 µL) 重復(fù)測(cè)量 3.0 mg/mL BSA 溶液 20 次，其中參比位置為裝有 PBS 緩沖液的相同超微 量比色皿。此外，使用 3.5 mL、10 mm 光程的標(biāo)準(zhǔn)石英比色 皿對(duì)同樣的溶液進(jìn)行另外 20 次重復(fù)測(cè)量，以裝有 PBS 緩沖液 的相同比色皿作為參比。這些測(cè)量均在 278 nm 處進(jìn)行，信號(hào) 采集平均時(shí)間為 1 秒，光譜帶寬為 2 nm。