人抗卵巢抗體(AOAb IgG) 酶免試劑盒
1仔細閱讀說明書
2確定試劑盒在有效期內(nèi)
3按說明書確定所有試劑齊全(數(shù)量、體積)
4標(biāo)本制備要規(guī)范,每份標(biāo)本體積要按2-3個復(fù)孔以上的量制備(貯存),盡量分裝做備份。短期內(nèi)無法實驗者,注意低溫保存
5準(zhǔn)備好所有實驗額外所需物品,如試管、吸頭、移液器、離心機等
6根據(jù)檢測標(biāo)本數(shù)量確定所需試劑的量
7按說明書將所用試劑平衡至室溫,配制所需試劑
DIY夾心法ELISA常見技術(shù)指南
8選擇抗體時選擇一個單抗和一個多抗進行配對;若選擇兩個單抗,必須識別不同表位的抗體;從同一家公司選擇抗體對。
9ELISA實驗中為了確定*信號和zui低背景應(yīng)將捕獲抗體(0.5-4μg/ml)和檢測抗體(0.25-2μg/ml)在預(yù)實驗中進行彼此相抗的滴定。同時,應(yīng)包括在適當(dāng)范圍內(nèi)的標(biāo)準(zhǔn)品的系列稀釋。按試劑說明書常規(guī)提供的范圍進行操作。
10標(biāo)準(zhǔn)品的配制:對于每種細胞因子應(yīng)仔細閱讀說明書,注意每批的細節(jié)。在使用細胞因子前,瞬時離心試劑瓶,盡可能多地收回其中的細胞因子。根據(jù)每批說明書中的細節(jié),將凍干的細胞因子復(fù)溶。
11一般待測抗原標(biāo)準(zhǔn)曲線的線性范圍的可通過將標(biāo)準(zhǔn)品做8次2倍系列稀釋從2000pg/ml到15pg/ml??衫脴?biāo)準(zhǔn)的ELISA操作流程、放大試劑盒、第三類試劑、或改變酶底物系統(tǒng)可在一定范圍內(nèi)提高靈敏度。
12為了優(yōu)化靈敏度,建議過夜孵育標(biāo)準(zhǔn)品和標(biāo)本。
13若使用過氧化物酶作為顯色系統(tǒng),應(yīng)嚴(yán)禁在洗液和稀釋液中加疊氮鈉,疊氮鈉可抑制過氧化物酶的活性。
14當(dāng)測定混合液體中的抗原時,如血清,建議在標(biāo)本稀釋液中加不相干的Ig.
注意事項
1.此試劑為體外檢測試劑,效期內(nèi)使用,試劑應(yīng)視為傳染物,不同總批號的試劑不能混用。
2.使用前應(yīng)將盒內(nèi)各試劑取出,室溫放置至少30分鐘。
3.保存于2-8℃,請勿冷凍,有效期請見盒內(nèi)標(biāo)示。
4.濃縮洗滌液出現(xiàn)結(jié)晶后,請于37℃孵育15分鐘
上海研鑫生物科技有限公司專業(yè)提供科研類ELISA試劑盒,是多家科研機構(gòu)和高校ELISA試劑盒供應(yīng)商,品種齊全,*。訂貨:021一60526042 : www.shyxsw.net
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