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ACE® C18-Amide
• 用于方法開(kāi)發(fā)的替代選擇性
• 改善極性、酸性、堿性和酚類(lèi)化合物的分離
• 用于UHPLC和HPLC的高柱效2μm、3μm、5μm和10μm顆粒
• 超惰性,可獲得蕞佳性能和可重現(xiàn)性
ACE C18-Amide液相色譜柱
用于提高極性保留和替代選擇性
方法開(kāi)發(fā)的理想色譜柱選擇
■ 相對(duì)C18和C8色譜柱,對(duì)極性分子 - 特別是酸類(lèi),具有替代選擇性
■ 與100%水含量的流動(dòng)相兼容
■ 用于UHPLC、HPLC和制備型分離的高柱效2μm、3μm、5μm和10μm顆粒
■ UV和LC/MS兼容性的低流失
*應(yīng)用
■ 小分子水溶性分析物和極性化合物
■ H鍵給予體、酸類(lèi)、堿類(lèi)和酚類(lèi)化合物
■ 小分子多肽
為什么ACE C18-Amide液相色譜柱可以提供替代選擇性?
■ ACE C18-Amide將C18與極性酰胺基結(jié)合在單一配體上
■ 延長(zhǎng)間隔區(qū)技術(shù)可以額外延長(zhǎng)色譜柱的使用壽命
利用ACE C18-Amide液相色譜柱的選擇性能力將色譜峰分開(kāi)
分離度方程可以確定影響分離度的參數(shù):N、α和k。近年來(lái),
重點(diǎn)關(guān)注使用超高效“UHPLC”色譜柱(如ACE Excel 2μm色
譜柱)作為實(shí)現(xiàn)分離目標(biāo)的手段。
然而,選擇性往往被忽視。
在影響分離度的三個(gè)參數(shù)中,選擇性是為重要的(參見(jiàn)圖1)。
通過(guò)利用柱效和選擇性,通??梢詫?shí)現(xiàn)更好和更快的分離。
ACE C18-Amide液相色譜柱是ACE系列鍵合相的*產(chǎn)品,其可以提供互補(bǔ)選擇性和2μm、3μm、5μm和10μm粒徑的選擇,以開(kāi)發(fā)堅(jiān)固耐用的UHPLC和HPLC方法。
圖1 N、α和k對(duì)分離度(Rs)的影響
對(duì)于N = 10,000、k = 4和α= 1.1的典型分離
增加N、α或k可以增加分離度(Rs),但是從上圖可以看出,N或k的增加都會(huì)迅速降低回報(bào)率。增加選擇性(α)則不會(huì)發(fā)生這個(gè)問(wèn)題,因此其在開(kāi)發(fā)分離方法時(shí)是這三個(gè)變量中為重要的優(yōu)化參數(shù)。
利用ACE鍵合相的固定相選擇性能力將色譜峰分開(kāi)
圖2闡明了兩種ACE鍵合相即C18-Amide與C18之間的差異。
盡管這兩種鍵合相均可以提供可能的來(lái)自它們各自C18鏈的強(qiáng)疏水作用,但嵌入C18-Amide相中的酰胺基會(huì)引入額外的相互作用模式,終增加極性化合物的保留并提供替代選擇性。
樣品:1)* 2)兒茶酚 3)2-甲基* 4)4-甲基鄰苯二酚5)3-甲基鄰苯二酚 6)4-硝基鄰苯二酚
流動(dòng)相:25:75乙腈/27mM H3PO4(溶于水中)
色譜柱尺寸:150 x 4.6mm
流速:1.50ml/min
溫度:30℃
波長(zhǎng):270nm
ACE C18-Amiede液相色譜柱可以使極性選擇性增強(qiáng)
ACE C18-Amide與刢先C18 UHPLC色譜柱的比較
色譜柱尺寸:50 x 2.1mm
樣品:1)* 2)兒茶酚 3)2-甲基* 4)4-甲基鄰苯二酚 5)3-甲基鄰苯二酚 6)4-硝基鄰苯二酚
流動(dòng)相:25:75甲醇/25mM H3PO4(溶于水中)
流速:0.30ml/min
溫度:30℃
波長(zhǎng):214nm
比較數(shù)據(jù)不代表所有應(yīng)用。
利用替代選擇性來(lái)進(jìn)行方法開(kāi)發(fā)
酸性、堿性和中性化合物的分離
樣品:1)甲基苯基亞砜 2)吲哚洛爾 3)3-羥基苯鉀酸 4)1,2-二甲氧基苯 5)小檗堿 6)楊梅素 7)胡椒堿 8)白楊素
流動(dòng)相:A = 20mM甲酸銨(溶于水中)(pH 3.0)B = 20mM甲酸銨(pH3.0)(溶于90:10(v/v)甲醇/水中)
梯度:在5分鐘內(nèi)3 – 100% B
色譜柱尺寸:50 x 2.1mm
流速:0.60ml/min
溫度:40℃
波長(zhǎng):254nm
與100%水含量的流動(dòng)相兼容
葡萄酒中有機(jī)酸的分離
樣品:1)草酸 2)酒石酸 3)蘋(píng)果酸 4)乳酸 5)抗壞血酸 6)檸檬酸
流動(dòng)相:40mM NH4H2PO4(溶于水中)(pH 2.5)
色譜柱:ACE Excel 3 C18-Amide, 250 x 2.1mm
流速:0.21ml/min
溫度:25℃
波長(zhǎng):214nm
ACE C18-Amide可以提供替代選擇性
食品和飲料添加劑 - *
樣品:1)香草酸 2)4-羥基苯鉀酸 3)* 4)4-羥基苯鉀醛 5)愈創(chuàng)木酚 6)乙基* 7)*
流動(dòng)相:A = 0.1%甲酸(溶于水中) B = 0.1%甲酸(溶于乙腈中)
梯度:在10分鐘內(nèi)30 – 55% B
色譜柱尺寸:150 x 4.6mm
流速:1.00ml/min
溫度:40℃
波長(zhǎng):260nm
類(lèi)固醇
樣品:1)* 2)*龍 3)雌三醇 4)皮質(zhì)酮 5)11a-羥孕酮 6)11-酮孕酮 7)21-羥孕酮 8)β-雌二醇 9)17α-雌二醇 10)17α-乙炔基雌二醇
流動(dòng)相:A = 0.1%甲酸(溶于水中) B = 0.1%甲酸(溶于乙腈中)
梯度:在10分鐘內(nèi)25 – 80% B
色譜柱尺寸:50 x 2.1mm
流速:0.40ml/min
溫度:25℃
波長(zhǎng):260nm
有保證的可重現(xiàn)性和*可擴(kuò)展性
ACE C18-Amide的可重現(xiàn)性擴(kuò)展
樣品:1)* 2)4-羥基苯鉀酸 3)乙酰水楊酸 4)苯鉀酸 5)2-羥基苯鉀酸 6)對(duì)羥基苯鉀酸乙酯
流動(dòng)相:35:65乙腈/0.1%TFA(溶于水中)
溫度:22℃
波長(zhǎng):254nm
將可用的2μm、3μm、5μm和10μm粒徑與從UHPLC到制備型HPLC規(guī)模的一系列柱尺寸相結(jié)合,可確保方法可重現(xiàn)地放大或縮小。
圖8中的色譜圖顯示,當(dāng)硅膠批次和硅烷批次改變時(shí)可以獲得的可重現(xiàn)性,并當(dāng)粒徑和柱直徑改變時(shí)可以獲得可重現(xiàn)的可擴(kuò)展性。
產(chǎn)品的可用性和規(guī)格
相 | 官能團(tuán) | 封端 | 粒徑(µm) | 孔徑(Å) | 表面積(m2/g) | 碳載量 | 大pH范圍 | 100%水相兼容 | USP列表 |
ACE C18-Amide | 具有完整酰胺極性基團(tuán)的十八烷基 | 是 | 2, 3, 5, 10 | 100 | 300 | 16.4 | 2.0-8.0a | Yes | L1/L60 |
為了獲得蕞佳色譜柱壽命,*使用2-8的pH范圍。為了在較高的pH值下增加色譜柱壽命,必須考慮有機(jī)緩沖液、低緩沖液濃度、高%有機(jī)溶劑和低溫。
為了在HPLC條件(高達(dá)5000psi/350bar)下進(jìn)一步延長(zhǎng)色譜柱壽命,*使用ACE保護(hù)柱芯柱或ACE HPLC柱前過(guò)濾器。
為了在UHPLC條件(高達(dá)15000psi/1000bar)下進(jìn)一步延長(zhǎng)色譜柱壽命,*使用ACE UHPLC柱前過(guò)濾器。
對(duì)于高達(dá)5000psi(350bar)的HPLC色譜柱連接器,*使用PEEK手緊接頭(p/n ACE-CC10)。
對(duì)于高達(dá)15000 psi(1000bar)的UHPLC色譜柱連接器,*可重復(fù)使用的接頭(p/n EXL-CC10)。
供貨信息:
ACE Excel 2µm C18-Amide UHPLC/HPLC色譜柱 (提供具有1000bar/15000psi壓力限制的雙重兼容型UHPLC / HPLC“Excel”硬件規(guī)格)
柱內(nèi)徑 | 20mm | 30mm | 35mm | 50mm | 75mm | 100mm | 125mm | 150mm |
2.1mm | EXL-1012-0202U | EXL-1012-0302U | EXL-1012-3502U | EXL-1012-0502U | EXL-1012-7502U | EXL-1012-1002U | EXL-1012-1202U | EXL-1012-1502U |
3.0mm | EXL-1012-0203U | EXL-1012-0303U | EXL-1012-3503U | EXL-1012-0503U | EXL-1012-7503U | EXL-1012-1003U | EXL-1012-1203U | EXL-1012-1503U |
4.6mm | EXL- 1012-0246U | EXL-1012-0346U | EXL-1012-3546U | EXL-1012-0546U | EXL-1012-7546U | EXL-1012-1046U | EXL-1012-1246U | EXL-1012-1546U |
ACE Excel 3µm C18-Amide UHPLC/HPLC色譜柱 (提供具有1000bar/15000psi壓力限制的雙重兼容型UHPLC / HPLC“Excel”硬件規(guī)格)
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ACE Excel 5µm C18-Amide UHPLC/HPLC色譜柱 (提供具有1000bar/15000psi壓力限制的雙重兼容型UHPLC / HPLC“Excel”硬件規(guī)格)
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ACE 5µm C18-Amide半制備型和制備型HPLC色譜柱
柱內(nèi)徑 | 50mm | 75mm | 100mm | 125mm | 150mm | 250mm |
7.75mm | ACE-1212-0508 | ACE-1212-7508 | ACE-1212-1008 | ACE-1212-1208 | ACE-1212-1508 | ACE-1212-2508 |
10.0mm | ACE-1212-0510 | ACE-1212-7510 | ACE-1212-1010 | ACE-1212-1210 | ACE-1212-1510 | ACE-1212-2510 |
21.2mm | ACE-1212-0520 | ACE-1212-7520 | ACE-1212-1020 | ACE-1212-1220 | ACE-1212-1520 | ACE-1212-2520 |
ACE 10µm C18-Amide分析型、半制備型和制備型HPLC色譜柱 (請(qǐng)查詢(xún))
ACE®是Advanced Chromatography Technologies Limited的注冊(cè)商標(biāo)。ACE Excel™是Advanced Chromatography Technologies Limited的商標(biāo)。Advanced Chromatography Technologies Limited承認(rèn)Agilent Technologies Inc.、Phenomenex Inc.、Thermo Fisher Scientific和Waters Corporation的注冊(cè)和未注冊(cè)商標(biāo),且與上述這些公司沒(méi)有任何隸屬關(guān)系。