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CellSorter單細胞微操縱分選系統(tǒng)

背景：
單細胞實驗主要是基于以下特點：
1.單細胞亦包含一個物種全部的遺傳信息；
2.單細胞實驗避免了細胞異質(zhì)性的干擾，準確性更高。
3.單細胞實驗有利于還原生物事件本身，諸多生物事件如胚胎發(fā)育、腫瘤形成及轉(zhuǎn)移等均以單細胞為起點。
概述

匈牙利Cellsorter公司推出的單細胞獲取及實施跟蹤分析平臺為獲取單細胞提供了完整的解決方案—全自動 Cellsorter單細胞高精準抓取分選系統(tǒng)。
Facsinapetri可從血液、骨髓、制備的組織細胞懸浮等液態(tài)體系中挑選出感興趣的單細胞,并可利用利用*的picovitro單細胞實時跟蹤分析培養(yǎng)板進行后期的單細胞實時跟蹤分析。
cellsorter單細胞抓取分選實時跟蹤分析系統(tǒng)以顯微鏡為基礎，采用計算機自動控制毛細管技術從少量血液、骨髓、制備的各種組織細胞懸浮液任何單一類型細胞或稀有細胞（如循環(huán)腫瘤細胞、內(nèi)皮細胞、干細胞以及血液、骨髓中相關細胞等）的分離抓取，操作步驟是由軟件控制。
整個過程分為三個步驟：
1．細胞識別
2．細胞獲取
3．細胞沉積
4．單細胞分析- the ultimate tool for single cell analysis!
抓取篩選的細胞可沉積到玻璃載片或者PCR管中,玻璃載片可以承載多大384個細胞,也可與picovitro單細胞跟蹤分析培養(yǎng)板聯(lián)用，進行各種細胞之間、DNA、RNA和蛋白質(zhì)生物合成之間的相互作用分CellSorter單細胞微操縱分選系統(tǒng)
Facs in a petri單細胞抓取分選實時跟蹤分析系統(tǒng)是Cellsoter公司一款主要用于識別、挑取、轉(zhuǎn)移懸液中單細胞或者單一類型細胞，然后利用picovitro單細胞實時跟蹤分析培養(yǎng)板進行后期的單細胞實時跟蹤分析。借助高清晰度的CCD 攝像機成像，操作者可直觀看到目的細胞，隨后通過操控軟件控制毛細管高效地完成對懸浮細胞或者是貼壁細胞的挑取及轉(zhuǎn)移。整個過程可視化，操作簡單，挑取準確，跟蹤分析實時方便。對于各種類型的單個細胞挑取、分析游刃有余。
該系統(tǒng)通過細胞識別、細胞挑取和細胞轉(zhuǎn)移、跟蹤實時分析四個步驟可以實現(xiàn)對懸浮體系中任何單一類型細胞或稀有細胞（如循環(huán)腫瘤細胞、內(nèi)皮細胞、干細胞以及血液、骨髓中相關細胞等）的抓取分離、分析，細胞可以轉(zhuǎn)移到PCR管等后續(xù)實驗裝置.
該系統(tǒng)以“所見即所得”的方式，幾乎涵蓋所有的單細胞獲取途徑，結(jié)合picovitro單細胞實時跟蹤分析培養(yǎng)板可進行下游基因、蛋白水平的研究。
Facs in a petri 單細胞抓取分選實時跟蹤分析系統(tǒng)在培養(yǎng)碟中原位自動分選細胞，具有高精度、細胞存活率高、純度高，而且不破壞細胞組織的特性，是高精準、全自動分選沉積單細胞的*。
系統(tǒng)優(yōu)勢
1).可直接從培養(yǎng)皿中進行細胞分選
2).分離粘結(jié)活細胞的細胞亞群，分離熒光或者冷光標記
3).無標記的和熒光的細胞都可通過軟件進行自動識別
4).可確保細胞分離后活力，并且可培養(yǎng)
5).分選熒光分子探針標記的特定細胞
6).單細胞收集進行進一步培養(yǎng)、克隆，RNA或者蛋白質(zhì)制備
7).免疫制備，進行目標細胞分類
8).可對各種粘結(jié)細胞進行分類
9).細胞篩選前的細胞培養(yǎng)
10).一般的分選過程只需幾分鐘就可完成
11).使用安裝在顯微鏡上的熒光濾片可實現(xiàn)多通道監(jiān)測
12).分選速度：1Cell/秒,可以一次性連續(xù)分選1000個細胞；
13).每一次可連續(xù)分選分揀出細胞個數(shù)：1~1000
14).自動化集成度高，工作效率高
速率為1Cell/秒,高通量分離，通過軟件自動標定并進行連續(xù)運行，單次連續(xù)運行多可以分離多達200個細胞；
多次連續(xù)運行可以達到1000個細胞以上。
15).儀器操作準確性：
可在細胞懸液中進行單細胞自動分離，*自動化的單細胞操作，人工干預少 避免了細胞異質(zhì)性的干擾，準確性更高
16). 針對細胞種類: 血液、骨髓、制備的各種組織細胞懸浮液,任何單一類型細胞或稀有細胞（如循環(huán)腫瘤細胞、內(nèi)皮細胞、干細胞以及血液、骨髓中相關細胞等）的分離,可保證細胞分離后活力，保證細胞可培養(yǎng)性
17).小操控體積:1nL——10 nL
18). 穩(wěn)定性:工作穩(wěn)定性強，可以單次連續(xù)高精度運行上百次，經(jīng)過Nature專家組驗證，相關報告已經(jīng)在Nature子刊發(fā)表
19)自動單細胞沉積功能：
 19.1)單細胞輸送到達每一個PCR管                
 19.2)滴液體積小于1ul
 19.3)一個循環(huán)可裝滿80個PCR管                  
 19.4)每個Cell沉積時間15~20秒
 19.5)可在一個玻璃蓋玻片上原位測試單個細胞沉積
20)自動單細胞沉積到PCR管
20.1)可將單細胞移動到每一個PCR管中
20.2)一個循環(huán)可填滿10PCR條，容納80個管
20.3)蓋玻片單細胞原位沉積試驗
20.4)小滴定體積優(yōu)于1ul
20.5)15~20秒每個細胞
21)計算機控制單元
全自動*控制臺可通過計算機USB接口控制流體閥和顯微LED照明光源，同時也可以自由地控制顯微鏡熒光快門，并且整合了高速控制閥實現(xiàn)流體快速、精密控制。
22)設備特點
22.1)兼容所有的倒置顯微鏡
22.2)快速手動調(diào)節(jié)通過LED照明光源
22.3)分選針頭更換快速、便捷
22.4)可通過連接環(huán)完美的安裝到顯微鏡的物鏡上
該系統(tǒng)配備高精度微移液管支架，控制臺始終保證微量吸液管位于視場的正中心， 并且微移液管控制臺可非常容易地安裝在物鏡上，同時軟件可對移液管的位置進行偏差校準。
微移液管的可通過轉(zhuǎn)動控制臺的旋鈕進行手動聚焦，且微移液管的科在顯微鏡中非常容易的被觀察到，同時顯微鏡的圖像可跟進調(diào)整； 玻璃微移液管更換非常便捷，當更換培養(yǎng)皿時簡單地取下來分選針頭即可。
CellSorter微量吸液管非自動化的細胞沉積平臺

a．微量吸液管的路徑。
  在一個典型的分類過程中，可根據(jù)路徑對細胞進行逐個提取，有200個細胞從培養(yǎng)皿中被提取。比例尺：100μm。
b．硬件仿真模擬的控制軟件。
 在虛擬的培養(yǎng)皿中，熒光細胞被標記為綠色小球，通過微量吸液管對細胞進行提取。
c．微量吸液管定位裝置微量吸液管布局圖。
  控制臺通過物鏡環(huán)固定在物鏡上方，玻璃微量吸液管被固定在控制臺中心光軸位置。微量吸液管頂端通過LED燈照射，照射光通過微量吸液管直接被引入到物鏡。微量吸液管可通過手動調(diào)節(jié)彈簧旋鈕上下移動到物鏡焦點位置。培養(yǎng)皿可以進行水平移動，微量吸液管上端通過撓性導管連接到*上。

玻璃微移液管
全自動細胞分析儀使用微量吸液管對細胞進行分選，微量吸液管內(nèi)孔徑范圍為50~80um；
可根據(jù)客戶的應用提供良好的內(nèi)孔徑方案；更小的微移液管可達亞微米級，用于大分子的操縱。
 

CellSorter全自動單細胞抓取與實時分析系統(tǒng)

基本原理：
CellSorter通過負壓將細胞吸入毛
細管中，測量負壓作用下細胞的
形變及所用時間或測量細胞粘附
分離時的臨界負壓來評價細胞的
形變特性，并記錄細胞的挑取
數(shù)。之后通過正壓將細胞轉(zhuǎn)移到
PCR管中，進行其他相關的細胞
和分子實驗等。

主要部件：
1. 含閥門控制器或分選頭的CellSorter主機
2. Zeiss Axio Observer熒光倒置顯微鏡
3. Marzhauser 顯微機械平移臺和控制桿
Rita Sala´nki et al, 2014
Péter K. Jania et al, 2016

主要特點：
1. 可從培養(yǎng)皿中直接挑取細胞
2. 分選后的細胞存活率可以達到90%以上
3. 每分鐘可分選3-4個細胞，每秒可捕獲1個細胞
4. 1個RUN可挑取的細胞總數(shù)可達1000個
5. 可實現(xiàn)納升級別的液滴處理精度
6. 硼硅玻璃毛細管，直徑5-70μm可定制