細胞工程(cellengineering)是指應用現(xiàn)代細胞生物學、發(fā)育生物學、遺傳學和分子生物學的理論與方法,按照人們的需要和設計,在細胞水平上的遺傳操作,重組細胞的結構和內含物,以改變生物的結構和功能,即通過細胞融合、核質移植、染色體或基因移植以及組織和細胞培養(yǎng)等方法,快速繁殖和培養(yǎng)出人們所需要的新物種的生物工程技術。
干細胞工程是在細胞培養(yǎng)技術的基礎上發(fā)展起來的一項新的細胞工程。它是利用干細胞的增殖特性,多分化潛能及其增殖分化的高度有序性,通過體外培養(yǎng)干細胞、誘導干細胞定向分化或利用轉基因技術處理干細胞以改變其特性的方法,以達到利用干細胞為人類服務的目的。
細胞治療中心的專家主任介紹干細胞工程其主要研究內容一方面是胚胎干細胞的研究,如建立ES細胞系并利用ES細胞的發(fā)育多能性即環(huán)境因素對細胞分化發(fā)育的影響,定向誘導細胞分化為特定的細胞如肌細胞、神經細胞等作為細胞移植的新來源。另一方面成體干細胞的研究主要包括成體組織干細胞的分離培養(yǎng)體內和植入體內,更新機體病變的組織器官恢復正常功能;并用干細胞作為基因治療的靶細胞;研究體內有效活化組織干細胞的方法,增強其功能。
細胞培養(yǎng)實驗室應能進行六方面的工作:無菌操作、孵育、制備、清洗、消毒自凈處理、儲藏。
1.無菌操作區(qū)
(1)無菌操作區(qū):無菌操作區(qū)只限于細胞培養(yǎng)及其他無菌操作的區(qū)域,zuiHAO能與外界隔離,不能穿行或受其他干擾。
理想的無菌操作室應劃為三部分:
a) 更衣室—―供更換衣服、鞋子及穿戴帽子和口罩。
b) 緩沖間—―位于更衣間與操作間之間,目的是為了保證操作間的無菌環(huán)境,同時可放置恒溫培養(yǎng)箱及某些必需的小型儀器。
c) 無菌操作間—―于無菌操作、細胞培養(yǎng)。其大小要適當,且其頂部不宜過高(不超過2.5m)以保證紫外線的有效自凈效果;墻壁光滑*以便清潔和消毒。工作臺安置不應靠墻壁,臺面要光滑壓塑作表面,漆成白色或灰色以利于解剖組織及酚紅顯示pH的觀察。
(2)凈化工作臺:操作簡單,安裝方便,占用空間小且凈化效果很好。一般細菌培養(yǎng)室使用的凈化工作臺主要有兩種:a)側流式或稱垂直式 b)外流式或稱水平層流式。
2.孵育區(qū)
本區(qū)對無菌的要求雖不比無菌區(qū)嚴格,但仍需清潔無塵,因此也應設置在干擾少而非來往穿行的區(qū)域。孵育可在孵箱或可控制溫度的溫室中進行,后者費用高,一般實驗室多采用孵箱進行工作。
3.制備區(qū)
在該區(qū)主要進行培養(yǎng)液及有關培養(yǎng)用的液體等的制備。
4.儲藏區(qū)
主要存放各類冰箱、干燥箱、液氮罐、無菌培養(yǎng)液、培養(yǎng)瓶等,此環(huán)境也需要清潔無塵。
5.清洗和消毒自凈區(qū)
清潔和消毒自凈區(qū)應與其他區(qū)域分開,主要進行所有細胞培養(yǎng)器皿的清洗、準備、消毒及三蒸水制備等工作。
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