人肝細(xì)胞核因子4α(HNF4α)ELISA試劑盒
在ELISA實驗前的注意事項:
1 仔細(xì)閱讀說明書
2 確定試劑盒在有效期內(nèi)
3 按說明書確定所有試劑齊全(數(shù)量、體積)
4 標(biāo)本制備要規(guī)范,每份標(biāo)本體積要按2-3個復(fù)孔以上的量制備(貯存),盡量分裝做備份。短期內(nèi)無法實驗者,注意低溫保存
5 準(zhǔn)備好所有實驗額外所需物品,如試管、吸頭、移液器、離心機等
6 根據(jù)檢測標(biāo)本數(shù)量確定所需試劑的量
7 按說明書將所用試劑平衡至室溫,配制所需試劑
DIY夾心法ELISA常見技術(shù)指南:
1、選擇抗體時選擇一個單抗和一個多抗進(jìn)行配對;若選擇兩個單抗,必須識別不同表位的抗體;從同一家公司選擇抗體對。
2、ELISA實驗中為了確定*信號和zui低背景應(yīng)將捕獲抗體(0.5-4μg/ml)和檢測抗體(0.25-2μg/ml)在預(yù)實驗中進(jìn)行彼此相抗的滴定。同時,應(yīng)包括在適當(dāng)范圍內(nèi)的標(biāo)準(zhǔn)品的系列稀釋。按試劑說明書常規(guī)提供的范圍進(jìn)行操作。
3、標(biāo)準(zhǔn)品的配制:對于每種細(xì)胞因子應(yīng)仔細(xì)閱讀說明書,注意每批的細(xì)節(jié)。在使用細(xì)胞因子前,瞬時離心試劑瓶,盡可能多地收回其中的細(xì)胞因子。根據(jù)每批說明書中的細(xì)節(jié),將凍干的細(xì)胞因子復(fù)溶。
4、一般待測抗原標(biāo)準(zhǔn)曲線的線性范圍的可通過將標(biāo)準(zhǔn)品做8次2倍系列稀釋從2000pg/ml 到15pg/ml??衫脴?biāo)準(zhǔn)的ELISA操作流程、放大試劑盒、第三類試劑、或改變酶底物系統(tǒng)可在一定范圍內(nèi)提高靈敏度。
5、為了優(yōu)化靈敏度,建議過夜孵育標(biāo)準(zhǔn)品和標(biāo)本。
6、若使用過氧化物酶作為顯色系統(tǒng),應(yīng)嚴(yán)禁在洗液和稀釋液中加疊氮鈉,疊氮鈉可抑制過氧化物酶的活性。
7、當(dāng)測定混合液體中的抗原時,如血清,建議在標(biāo)本稀釋液中加不相干的Ig.
上??ㄟ~舒生物科技有限公司主營各種屬ELISA試劑盒,質(zhì)量保證,售后完善。服務(wù)于高校及免疫學(xué)科研單位。竭誠為您提供更好的服務(wù)更優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品。
(注:本試劑僅用于科研,咨詢!)
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