人血管內(nèi)皮細(xì)胞黏附因子-1（sVCAM-1/sCD106）ELISA試劑盒

Elisa的操作步驟及要點(diǎn)
（一）操作步驟
1. 包被抗原：用包被液將抗原作適當(dāng)稀釋, 一般為1～10μg /孔，每孔加200μl，37℃溫育1小時(shí)后，4℃冰箱放置16～18小時(shí)。
2. 洗滌：倒盡板孔中液體，加滿洗滌液，靜放三分鐘，反復(fù)三次，zui后將反應(yīng)板倒置在吸水紙上，使孔中洗滌液流盡。
3. 加封閉液200μl，37℃放置一小時(shí)。
4. 洗滌同2。
5. 加被檢血清：用稀釋液將被檢血清作幾種稀釋,，每孔200μl。同時(shí)作稀釋液對照。37℃放置2小時(shí)。
6. 洗滌同2。
7. 加辣根過氧化物酶羊抗兔IgG, 每孔200μl, 放置37℃ 1小時(shí)。
8. 洗滌同2。
9. 加底物：鄰苯二胺溶液加200ml，室溫暗處10--15分鐘。
10. 加終止液：每孔50μl。
11. 觀察結(jié)果：用酶聯(lián)免疫檢測儀記錄490nm讀數(shù)。
（二）操作要點(diǎn)
優(yōu)質(zhì)的試劑，良好的儀器和正確的操作是保證 ELISA 檢測結(jié)果準(zhǔn)確可靠的必要條件。ELISA的操作因固相載體的形成不同而有所差異，國內(nèi)醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)一般均用板式點(diǎn)。本文將敘述板式 ELISA 各個(gè)操作步驟的注意要點(diǎn)，珠式、管式及磁性球 ELSIA，國外試劑均與特殊儀器配合應(yīng)用，兩者均有詳細(xì)的使用說明，嚴(yán)格遵照規(guī)定操作，必能得出準(zhǔn)確的結(jié)果。

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