植物幾丁質(zhì)酶(chitinase)ELISA試劑盒
樣品處理程序(樣品在提取過程中,要嚴格按說明書操作,提取過程中應準確稀釋,否則會出現(xiàn)結(jié)果不準確,樣品應當保存在陰涼避光之處及冷藏保存)
取10g粉碎的樣品,加 20ml 70%甲醇溶液
強力振蕩3分鐘
用Whatman 濾紙過濾
取25µl處理后的樣品,加入25µl*于反應孔中(樣本稀釋倍數(shù)為2)
酶免分析步驟
實驗須知
實驗開始前請將所有試劑于盒外充分恢復至室溫(25±2℃),時間約2小時?;販刂潦覝兀?/span>25±2℃)后再取出微孔條,多余的微孔條重新密封立即于2~8℃干燥保存
注:一定保證回溫充分,否則影響檢測的精確度和準確度。
使用后請立即將試劑放回2~8℃保存
請不要改變分析程序
請使用精確的微量移液器
操作一旦開始,請不要中斷任何程序
ELISA結(jié)果的可重復性*程度的取決于操作程序,請嚴格按照要求操作
為避免交叉污染,每個標準品和樣品均應使用不同的吸頭加樣
加樣時請勿讓吸頭接觸微孔中的溶液或內(nèi)表面
分析步驟
預*行編號,標記B0、標準品和樣品的位置,*進行雙孔檢測. 取所需數(shù)量的微孔(微孔條可拆),將多余板條重新密封并立即放回2~8℃保存
樣品稀釋液(10×)、濃縮洗滌液(10×)稀釋成工作液(蒸餾水或去離子水稀釋)
在B0孔中加入50µl0.0 ng/ ml標準品溶液
在各標準孔中加入50μl的標準品溶液
在各樣品孔中加入50µl樣品溶液
在所有孔中加入50µl的抗總*抗體酶結(jié)合物
輕輕晃動反應板幾秒鐘。
37℃溫浴30min (溫浴過程中不時輕拍反應板,可以減少雙孔誤差)
甩掉孔中液體,用洗液洗滌微孔板5次,zui后一次應在吸水紙上拍打以*除去孔中液體。
反應洗滌程序完成后,立即用微量移液器在每個微孔中先加入50µl顯色液A,再加 50µl顯色液B;輕微晃動反應板使之*混勻
37℃溫浴10min
每孔中加入50µl終止液,混勻
在450nm下檢測吸光度,結(jié)果在5min內(nèi)讀取。
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ELISA法是免疫診斷中的一項新技術(shù),現(xiàn)已成功地應用于多種病原微生物所引起的傳染病、寄生蟲病及非傳染病等方面的免疫診斷。也已應用于大分子抗原和小分子抗原的定量測定,根據(jù)已經(jīng)使用的結(jié)果,認為ELISA法具有靈敏、特異、簡單、快速、穩(wěn)定及易于自動化操作等特點。不僅適用于臨床標本的檢查,而且由于一天之內(nèi)可以檢查幾百甚*千份標本,因此,也適合于血清流行病學調(diào)查。本法不僅可以用來測定抗體,而且也可用于測定體液中的循環(huán)抗原,所以也是一種早期診斷的良好方法。因此ELISA法在生物醫(yī)學各領域的應用范圍日益擴大,
可概括四個方面:
1、免疫酶染色各種細胞內(nèi)成份的定位。
2、研究抗酶抗體的合成。
3、顯現(xiàn)微量的免疫沉淀反應。
4、定量檢測體液中抗原或抗體成份。
Elisa試驗是一種敏感性高,特異性強,重復性好的實驗診斷方法。由于其試劑穩(wěn)定、易保存,操作簡便,結(jié)果判斷較客觀等因素,已廣泛應用在免疫學檢驗的各領域中。ELISA檢測試劑盒是用于體外定性檢測人血清或血漿中的抗人類戊型肝炎(HEV)病毒 IgM 抗體ELISA檢測。指標齊全elisa試劑盒供給科研單位實驗研究,高校發(fā)布文獻,可提供免費代檢測,一周出數(shù)據(jù),公司具有國內(nèi)外的技術(shù)水平,更好的售后服務和優(yōu)質(zhì)的解決方案,為您提供高品質(zhì)高服務高創(chuàng)新的產(chǎn)品。
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