人*S轉(zhuǎn)移酶Mu1(GSTM1)ELISA kit
酶聯(lián)免疫分析(ELISA試劑盒)組成:
試劑盒組成 | 48孔配置 | 96孔配置 | 保存 |
說明書 | 1份 | 1份 | |
封板膜 | 2片(48) | 2片(96) | |
密封袋 | 1個 | 1個 | |
酶標(biāo)包被板 | 1×48 | 1×96 | 2-8℃保存 |
標(biāo)準(zhǔn)品 | 0.5ml×1瓶 | 0.5ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 | 1.5ml×1瓶 | 1.5ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
酶標(biāo)試劑 | 3 ml×1瓶 | 6 ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
樣品稀釋液 | 3 ml×1瓶 | 6 ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
顯色劑A液 | 3 ml×1瓶 | 6 ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
顯色劑B液 | 3 ml×1瓶 | 6 ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
終止液 | 3ml×1瓶 | 6ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
20倍濃縮洗滌液 | 20ml×1瓶 | 30ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
靈敏度:具體請查看說明書.
產(chǎn)品用途: 科研ELISA檢測試劑盒.提供實驗代測服務(wù).
標(biāo)本收集注意事項:
1) 在收集標(biāo)本前都必須有一個完整的計劃,必須清楚要檢測的成份是否足夠穩(wěn)定。
2) 我們提倡新鮮標(biāo)本盡早檢測,對收集后及時進(jìn)行檢測。
elisa試劑盒的優(yōu)點:
一、高效、靈敏、特異的抗體;
二、穩(wěn)定的重復(fù)性和可靠性;
三、吸附性能好,空白值低,孔底透明度高的固相載體;
四、適用血清、血漿、組織勻漿液、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等等多種標(biāo)本類型;
五、zui大限度的節(jié)省實驗經(jīng)費。
卡邁舒生物ELISA(酶聯(lián)免疫)試劑盒服務(wù)承諾:
一、產(chǎn)品質(zhì)量保證,有問題免費包換
二、提供免費代測服務(wù)(提供來樣檢測服務(wù),zui大限度實驗結(jié)果的有效性節(jié)約您的實驗時間)
三、提供全程技術(shù)指導(dǎo)。
標(biāo)本收集:
1. 收集血液的試管應(yīng)為一次性的無熱原,無內(nèi)毒素試管。
2. 血漿抗凝劑*使用EDTA。避免使用溶血,高血脂標(biāo)本。
3. 標(biāo)本應(yīng)清澈透明,懸浮物應(yīng)離心去除。
4. 標(biāo)本收集后若不及時檢測,請按一次使用量分裝,凍存于-20℃,-70℃電冰箱內(nèi),避免反復(fù)凍融,3-6月內(nèi)檢測。
5. 如果您的樣本中檢測物濃度高于標(biāo)準(zhǔn)品zui高值,請根據(jù)實際情況,做適當(dāng)倍數(shù)稀釋(建 議做預(yù)實驗,以確定稀釋倍數(shù))。
注意事項:
1. 試劑盒使用前請保存在2-8℃。復(fù)溶后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)分裝后,將其放在-20~-70℃貯存。
2. 濃縮*化抗體,濃縮酶結(jié)合物體積小,運輸中顛簸和可能的倒置,會使液體沾到管壁 或瓶蓋。因此使用前請用手甩幾下或1000轉(zhuǎn)/分離心1分鐘,以使附著管壁或瓶蓋的液體沉積到管底。取用前,請用移液器小心吹打4-5次使溶液混勻。
3. 從冰箱中取出的濃縮洗滌液可能有結(jié)晶,屬于正?,F(xiàn)象,微加熱至40℃使結(jié)晶*溶解后 再配制洗滌液。(加熱溫度不要超過50℃)使用時洗滌液應(yīng)為室溫。
4. 若需要分次使用標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)按照每一次用量分裝,將其放在-20~-70℃貯存。避免反復(fù)凍 融。
5. 不同批號的試劑盒組份不能混用(洗滌液和反應(yīng)終止液除外)。
6. 充分輕微混勻?qū)Ψ磻?yīng)結(jié)果尤為重要,使用微量振蕩器(使用zui低頻率),如無微量振蕩器,可在反應(yīng)前手工輕輕敲擊酶標(biāo)板框混勻。
7. 在試驗中標(biāo)準(zhǔn)品和樣本檢測時建議作雙孔檢測。
8. 試驗中所用的試管和吸頭均為一次性使用,嚴(yán)禁在不同的液體之間混用!否則將影響試 驗結(jié)果。
9. 試驗中請穿著試驗服并帶乳膠手套做好防護(hù)工作。特別是檢測血液或者其他體液標(biāo)本時, 請按國家生物試驗室安全防護(hù)條列執(zhí)行。
檢測前準(zhǔn)備工作:
1. 請?zhí)崆?/span>20分鐘從冰箱中取出試劑盒,以平衡至室溫。
2. 將濃縮洗滌液用雙蒸水稀釋(1:20)。未用完的放回4℃。
3. 標(biāo)準(zhǔn)品: 加入標(biāo)準(zhǔn)品/標(biāo)本稀釋液0.5ml至凍干標(biāo)準(zhǔn)品中,靜置15分鐘,待其充分溶解后,輕輕混勻(濃度為1000 pg/ml)。然后根據(jù)需要進(jìn)行稀釋。(建議標(biāo)準(zhǔn)曲線使用以下濃度: 1000、500、250、125、62.5、31.25、15.6、0 pg/ml)。復(fù)溶標(biāo)準(zhǔn)品原液(1000 pg/ml)若未用完請分裝后放入-20℃以下電冰箱內(nèi)保存,保存兩個月。已稀釋的標(biāo)準(zhǔn)品請廢棄。
4. *化抗體工作液:按當(dāng)次試驗所需要得用量,使用前20分鐘,以*化抗體稀釋液稀釋濃縮*化抗體(1:30)成工作濃度。當(dāng)日使用。若實驗次數(shù)過多導(dǎo)致*化 抗體量不足,可向我們公司單獨購買*化抗體。(須提供抗體批號)
5. 酶結(jié)合物工作液:按當(dāng)次試驗所需要得用量,使用前20分鐘,以酶結(jié)合物稀釋液稀釋濃 縮酶結(jié)合物(1:30) 成工作濃度。當(dāng)日使用。若實驗次數(shù)過多導(dǎo)致濃縮酶結(jié)合物量不足, 可向我們公司單獨購買濃縮酶結(jié)合物。(須提供酶結(jié)合物批號)
洗滌方法:
1. 自動洗板機(jī):要求注入的洗滌液為350ul,注入與吸出間隔15-30秒。洗板5次。
2. 手工洗板:甩盡孔內(nèi)液體,在潔凈的吸水紙上拍干,每孔加洗滌液350ul,靜置30秒后甩盡液體,在厚迭吸水紙上拍干。洗板5次。
操作步驟:
1.從已平衡至室溫的密封袋中取出試驗所需板條,未用的板條和干燥劑請放回鋁箔袋內(nèi)壓 實自封條,密封口袋,放回4℃。
2.空白孔加標(biāo)準(zhǔn)品和標(biāo)本稀釋液,其余相應(yīng)孔中加標(biāo)本或不同濃度標(biāo)準(zhǔn)品(100ul/孔),用封板膠紙封住反應(yīng)孔,36℃孵箱孵育90分鐘。
3.提前20分鐘準(zhǔn)備*化抗體工作液。
4.洗板5次。
5.空白孔加*化抗體稀釋液,其余孔加入*化抗體工作液(100ul/孔)。用新封板膠紙封住反應(yīng)孔,36℃孵箱孵育60分鐘。
6.提前20分鐘準(zhǔn)備酶結(jié)合物工作液。避光室溫(22-25 ) ℃ 放置。
7.洗板5次。
8.空白孔加酶結(jié)合物稀釋液,其余孔加入酶結(jié)合物工作液(100ul/孔)。用新封板膠紙封住反應(yīng)孔,36℃孵箱,避光孵育30分鐘。
9.打開酶標(biāo)儀電源,預(yù)熱儀器,設(shè)置好檢測程序。
10.洗板5次。
11.加入顯色底物(TMB)100ul/孔,避光36℃孵箱,避光孵育15分鐘。
12.加入終止液100ul/孔, 混勻后即刻測量OD450值(3分鐘內(nèi))。在儀器保存讀數(shù)結(jié)果并打印一份紙質(zhì)結(jié)果。
13.實驗完畢后將未用完的試劑按規(guī)定的保存溫度放回電冰箱保存至有效期結(jié)束。
建議保存酶標(biāo)板框,以備下次或者今后試驗使用。
結(jié)果判斷:
1. 每個標(biāo)準(zhǔn)品和標(biāo)本的OD值應(yīng)減去空白孔的OD值。
2. 手工繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。以標(biāo)準(zhǔn)品濃度作橫坐標(biāo),OD值作縱坐標(biāo),以平滑線連接各標(biāo)準(zhǔn)品的坐標(biāo)點。通過標(biāo)本的OD值可在標(biāo)準(zhǔn)曲線上查出其濃度。
3. 若標(biāo)本OD值高于標(biāo)準(zhǔn)曲線上限,應(yīng)適當(dāng)稀釋后重測,計算濃度時應(yīng)乘以稀釋倍數(shù)。
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