硼砂緩沖液(0.05mol/L,pH9.3-10.1)
【產(chǎn)品編號:CL-Y3169】
【規(guī)格:500ml】室溫,12個月】
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雙位點一步法
在雙抗體夾心法測定抗原時,如應(yīng)用針對抗原分子上兩個不同抗原決定簇的單克隆抗體分別作為固相抗體和酶標(biāo)抗體,則在測定時可使標(biāo)本的加入和酶標(biāo)抗體的加入兩步并作一步(圖15-5)。這種雙位點一步不但簡化了操作,縮短了反應(yīng)時間,如應(yīng)用高親和力的單克隆抗體,測定的敏感性和特異性也顯著提高。單克隆抗體的應(yīng)用使測定抗原的ELISA提高到新水平。
在一步法測定中,應(yīng)注意鉤狀效應(yīng)(hookeffect),類同于沉淀反應(yīng)中抗原過剩的后帶現(xiàn)象。當(dāng)標(biāo)本中待測抗原濃度相當(dāng)高時,過量抗原分別和固相抗體及酶標(biāo)抗體結(jié)合,而不再形成夾心復(fù)合物,所得結(jié)果將低于實際含量。鉤狀效應(yīng)嚴(yán)重時甚至可出現(xiàn)假陰性。
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4.抗體效價測定
抗體效價測定是指測定抗體的物理狀態(tài)及其在體內(nèi)的滯留時間,以其與抗原反應(yīng)的多少來表示其免疫效果。
抗體效價測定是根據(jù)大分子顆??乖谄湎鄳?yīng)的抗體相結(jié)合,
在適量的電解質(zhì)存在及一定的溫度下,經(jīng)過一定時間可出現(xiàn)肉眼可見的凝集團(tuán)塊,醫(yī)學(xué)稱為凝集反應(yīng),一般均以標(biāo)準(zhǔn)抗原測定免疫血清或患者血清中抗體的效價。
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