乙酸鉀緩沖液(0.1mol/L,pH3.6-5.6)
【產(chǎn)品編號(hào):CL-Y3187】
【規(guī)格:500ml】室溫,12個(gè)月 】
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3.ELISA可用于測(cè)定抗原,也可用于測(cè)定抗體。在這種測(cè)定方法中有3種必要的試劑:①固相的抗原或抗體;②酶標(biāo)記的抗原或抗體;③酶作用的底物。根據(jù)試劑的來源和標(biāo)本的性狀以及檢測(cè)的具備條件,可設(shè)計(jì)出各種不同類型的檢測(cè)方法。
一、雙位點(diǎn)一步法
在雙抗體夾心法測(cè)定抗原時(shí),如應(yīng)用針對(duì)抗原分子上兩個(gè)不同抗原決定簇的單克隆抗體分別作為固相抗體和酶標(biāo)抗體,則在測(cè)定時(shí)可使標(biāo)本的加入和酶標(biāo)抗體的加入兩步并作一步(圖15-5)。這種雙位點(diǎn)一步不但簡(jiǎn)化了操作,縮短了反應(yīng)時(shí)間,如應(yīng)用高親和力的單克隆抗體,測(cè)定的敏感性和特異性也顯著提高。單克隆抗體的應(yīng)用使測(cè)定抗原的ELISA提高到新水平。
在一步法測(cè)定中,應(yīng)注意鉤狀效應(yīng)(hookeffect),類同于沉淀反應(yīng)中抗原過剩的后帶現(xiàn)象。當(dāng)標(biāo)本中待測(cè)抗原濃度相當(dāng)高時(shí),過量抗原分別和固相抗體及酶標(biāo)抗體結(jié)合,而不再形成夾心復(fù)合物,所得結(jié)果將低于實(shí)際含量。鉤狀效應(yīng)嚴(yán)重時(shí)甚至可出現(xiàn)假陰性。
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4.抗體效價(jià)測(cè)定
抗體效價(jià)測(cè)定是指測(cè)定抗體的物理狀態(tài)及其在體內(nèi)的滯留時(shí)間,以其與抗原反應(yīng)的多少來表示其免疫效果。
抗體效價(jià)測(cè)定是根據(jù)大分子顆粒抗原于其相應(yīng)的抗體相結(jié)合,
在適量的電解質(zhì)存在及一定的溫度下,經(jīng)過一定時(shí)間可出現(xiàn)肉眼可見的凝集團(tuán)塊,醫(yī)學(xué)稱為凝集反應(yīng),一般均以標(biāo)準(zhǔn)抗原測(cè)定免疫血清或患者血清中抗體的效價(jià)。乙酸鉀緩沖液(0.1mol/L,pH3.6-5.6)
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