His6 融和蛋白純化試劑盒 Western Blot免疫組化實(shí)驗(yàn)原理:
根據(jù)抗原抗體反應(yīng)和化學(xué)顯色原理,組織切片或細(xì)胞標(biāo)本中的抗原先和一抗結(jié)合,再利用一抗與標(biāo)記、熒光素等的二抗進(jìn)行反應(yīng),前者再用標(biāo)記辣根過氧化物酶(HRP)或堿性磷酸酶(AKP)等的抗(如鏈霉親和素等)結(jié)合,zui后通過呈色反應(yīng)或熒光來顯示細(xì)胞或組織中化學(xué)成分,在光學(xué)顯微鏡或熒光顯微鏡下可清晰看見細(xì)胞內(nèi)發(fā)生的抗原抗體反應(yīng)產(chǎn)物,從而能夠在細(xì)胞爬片或組織切片上原位確定某些化學(xué)成分的分布和含量。
His6 融和蛋白純化試劑盒 Western Blot免疫組化主要步驟:
(一)切片制備. 洗載玻片:將載玻片置于重鉻酸鉀和濃H2SO4混合液中,目的是為了將載玻片上的硅膠等除去,同時(shí)使一些肉眼看不見的凹凸不平的表面變平整,便于組織吸附,然后置于清水中清洗,除去殘余的重鉻酸鉀和濃H2SO4 (大約沖一個(gè)小時(shí)左右),再將載玻片浸泡于酒精之中,然后放到架子上,置于37°C溫箱中,將多聚賴氨酸涂布于玻片的表面,由于Lys帶正電,而大多數(shù)的組織帶負(fù)電荷,從而產(chǎn)生吸附作用。
2. 包埋組織:先在鐵模具中加入一些液態(tài)石蠟,先稍微冷卻,然后再將待包埋的組織置于石蠟之中,并排列整齊,再將塑料模具盒蓋上,zui后加入少許液體石蠟,進(jìn)行冷凍,使石蠟變成固態(tài)。
3. 切片:將包埋好的組織從模具上取下來,并置于石蠟切片機(jī)上,切片機(jī)通過調(diào)節(jié)上下左右來使組織和切割方向*,然后調(diào)節(jié)切片的厚度,一般為5mm, 如果比較難切,則可以適當(dāng)調(diào)整厚度。用小鑷子將包含有完整組織的載玻片置于40°C溫水中。
4. 撈組織:當(dāng)組織載玻片置于40°C溫水中之前,要先將水浴中的氣泡趕走,以免氣泡受熱上浮而貼到組織上,組織受熱展開,是組織不起皺紋,用載玻片撈組織時(shí),一般取載玻片的下/3或者下/2一般每種組織撈5-6張,其中2-3張是備用的,每張載玻片上通常撈兩份組織,做對(duì)照使用,這樣形成的誤差就比較小了,而且撈載玻片的時(shí)候方向*,以便觀察,再將撈出來的載玻片置于架子上,放入37°C溫箱中烘干。His6 融和蛋白純化試劑盒 Western BlotGOY-S0 Western Blot 彩虹 預(yù)染蛋白質(zhì)分子量標(biāo)準(zhǔn)(窄譜,2-73kDa) 20次/00微升
GOY-S02 Western Blot 彩虹 預(yù)染蛋白質(zhì)分子量標(biāo)準(zhǔn)(窄譜,2-73kD) 50次/250微升
GOY-S03 Western Blot 彩虹 預(yù)染蛋白質(zhì)分子量標(biāo)準(zhǔn)(窄譜,2-73kDa) 00次/500微升
GOY-S04 Western Blot 彩虹 預(yù)染蛋白質(zhì)分子量標(biāo)準(zhǔn)(中譜,2-05kDa) 20次/00微升
GOY-S05 Western Blot 彩虹 預(yù)染蛋白質(zhì)分子量標(biāo)準(zhǔn)(中譜,2-05kDa) 50次/250微升
GOY-S06 Western Blot 彩虹 預(yù)染蛋白質(zhì)分子量標(biāo)準(zhǔn)(中譜,2-05kDa) 00次/500微升
GOY-S07 Western Blot 彩虹 預(yù)染蛋白質(zhì)分子量標(biāo)準(zhǔn)(寬譜,2-220kDa) 20次/00微升
GOY-S08 Western Blot 彩虹 預(yù)染蛋白質(zhì)分子量標(biāo)準(zhǔn)(寬譜,2-220kDa) 50次/250微升
GOY-S09 Western Blot 彩虹 預(yù)染蛋白質(zhì)分子量標(biāo)準(zhǔn)(寬譜,2-220kDa) 00次/500微升
GOY-S0 窄譜 預(yù)染蛋白質(zhì)分子量標(biāo)準(zhǔn)(藍(lán)色,2-7lkDa) 20次/00微升
GOY-S 窄譜 預(yù)染蛋白質(zhì)分子量標(biāo)準(zhǔn)(藍(lán)色,2-7lkDa) 50次/250微升
GOY-S2 窄譜 預(yù)染蛋白質(zhì)分子量標(biāo)準(zhǔn)(藍(lán)色,2-7lkDa) 00次/500微升
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