硝酸纖維素膜(NC)Western Blot隨著免疫組織化學技術的發(fā)展和各種特異性抗體的出現(xiàn),使許多疑難腫瘤得到了明確診斷。在常規(guī)腫瘤病理診斷中,有5%-0%的病例單靠常規(guī)染色難以作出明確的診斷,而借助免疫組化技術準確率可高達98%。
硝酸纖維素膜(NC)Western Blot 免疫組化染色流程
SP法
)脫蠟、水化;2)PBS洗2~3次各5分鐘;
3)3%H2O2(80%甲醇)滴加在TMA上,室溫靜置0分鐘;
4)PBS洗2~3次各5分鐘;
5)抗原修復;
6)PBS洗2~3次各5分鐘;
7)滴加正常山羊血清封閉液,室溫20分鐘。甩去多余液體。
8)滴加Ⅰ抗50μl,室溫靜置小時或者4℃過夜或者37℃小時。
9)4℃過夜后需在37℃復溫45分鐘。
0)PBS洗3次各5分鐘;
)滴加Ⅱ抗40~50μl,室溫靜置,或37℃小時;
2)II抗中可加入0.05%的tween-20。
3)PBS洗3次各5分鐘;
4)DAB顯色5~0分鐘,在顯微鏡下掌握染色程度;
5)PBS或自來水沖洗0分鐘;
6)蘇木精復染2分鐘,鹽酸酒精分化;
7)自來水沖洗0~5分鐘;
8)脫水、透明、封片、鏡檢。
SABC法
)脫蠟、水化。
2)PBS洗兩次各5分鐘。
3)用蒸餾水或PBS配置新鮮的3%H2O2,室溫封閉5~0分鐘,蒸餾水洗3次。
4)抗原修復。
5)PBS洗5分鐘。
6)滴加正常山羊血清封閉液,室溫20分鐘。甩去多余液體。
7)滴加Ⅰ抗,室溫小時或者4℃過夜或者37℃小時(4℃過夜后在37℃復溫45分鐘)。
8)PBS洗三次每次2分鐘。
9)滴加化二抗,20℃~37℃20分鐘。
0)PBC洗3次每次2分鐘。
)滴加試劑SABC,20℃~37℃20分鐘。
2)PBS洗4次每次5分鐘。
3)DAB顯色:DAB顯色試劑盒或者自配顯色劑顯色(鏡下掌握顯色程度)。
4)蒸餾水洗。蘇木素復染2分鐘、鹽酸酒精分化。
脫水、透明、封片、鏡檢。
H-00 增強型化學發(fā)光試劑(ECL) Western Blot Western Blot 50 ml
H-0 增強型化學發(fā)光試劑(ECL) Western Blot 00 ml
H-02 增強型化學發(fā)光試劑(ECL) Western Blot Western Blot 250 ml
H-03 5ⅹWestern Blot 膜封閉液 Western Blot 200 ml
H-04 0ⅹWestern Blot膜沖洗液 Western Blot 000 ml
H-05 增強型HRP-DAB底物顯色試劑盒 Western Blot 00 ml
H-06 增強型HRP-DAB底物顯色試劑盒 Western Blot 500 ml
H-07 TMB底物顯色試劑盒 Western Blot Western Blot 00 ml
H-08 TMB底物顯色試劑盒 Western Blot Western Blot 500 ml
H-09 PVDF膜 Western Blot 20cm×20cm(0張)
H-0 PVDF膜Western Blot 20cm×20cm(25張)
H- 20cm×20cm(0張)
H-2 20cm×20cm(25張)
GOY-S4 Flag融和蛋白純化試劑盒 Western Blot 0次
GOY-S42 HA融和蛋白純化試劑盒 Western Blot 0次
GOY-S43 Myc融和蛋白純化試劑盒 Western Blot 0次
GOY-S44 30%單/雙丙烯酰胺預制膠溶液 Western Blot(37.5:) 00ml
GOY-S45 30%單/雙丙烯酰胺預制膠溶液 Western Blot(37.5:) 500ml
GOY-S46 40%單/雙丙烯酰胺預制膠溶液 Western Blot(37.5:) 00ml
GOY-S47 40%單/雙丙烯酰胺預制膠溶液 Western Blot(37.5:) 500ml
GOY-S48 丙烯酰胺(Acrylamide) Kg
GOY-S49 丙烯酰胺(Acrylamide) 5 Kg
GOY-S50 N,N-亞甲基雙丙烯酰胺(別名甲叉雙丙烯酰胺) 50 g
GOY-S5 N,N-亞甲基雙丙烯酰胺(別名甲叉雙丙烯酰胺) 250 g
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