A Fc段受體Ⅰ ELISA試劑盒 酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
使用說(shuō)明書elisa法測(cè)定
規(guī)格:48T/96T
本試劑盒僅供體外研究使用!
ELISA法定量測(cè)定人尿液或其它相關(guān)生物液體中A Fc段受體Ⅰ ELISA試劑盒 的含量。
實(shí)驗(yàn)原理
用純化的抗體包被微孔板,制成固相載體,往包被抗指標(biāo)抗體的微孔中依次加入標(biāo)本或標(biāo)準(zhǔn)品、化的抗指標(biāo)抗體、HRP標(biāo)記的親和素,經(jīng)過(guò)*洗滌后用底物TMB顯色。TMB在過(guò)氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的指標(biāo)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD值),計(jì)算樣品濃度。
2.濃洗滌液低溫保存會(huì)有鹽析出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶。
4.剛開(kāi)啟的酶聯(lián)板孔中可能會(huì)含有少許水樣物質(zhì),此為正?,F(xiàn)象,不會(huì)對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果造成任何影響。
需要而未提供的試劑和器材
. 標(biāo)準(zhǔn)規(guī)格酶標(biāo)儀
2. 高速離心機(jī)
3. 電熱恒溫培養(yǎng)箱
4. 干凈的試管和Eppendof管
5. 系列可調(diào)節(jié)移液器及吸頭,一次檢測(cè)樣品較多時(shí),用多通道移液器
6. 蒸餾水,容量瓶等
. 酶聯(lián)板(Assay plate ):一塊(96孔)。
2. 標(biāo)準(zhǔn)品(Standard):2瓶。
3. 樣品稀釋液(Sample Diluent):×20ml/瓶。
4. 標(biāo)記抗體稀釋液(Biotin-antibody Diluent):×0ml/瓶。
5. 辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液 (HRP-avidin Diluent):×0ml/瓶。
6. 標(biāo)記抗體(Biotin-antibody):×20μl/瓶(:00)
7. 辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記親和素(HRP-avidin):×20μl/瓶(:00)
8. 底物溶液(TMB Substrate):×0ml/瓶。
9. 濃洗滌液(Wash Buffer):×20ml/瓶,使用時(shí)每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
0. 終止液(Stop Solution):×0ml/瓶(2N H2SO4)。
標(biāo)本的采集及保存
. 血清:全血標(biāo)本請(qǐng)于室溫放置2小時(shí)或4℃過(guò)夜后于000g離心20分鐘,取上清即可檢測(cè),或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
2. 血漿:可用EDTA或肝素作為抗凝劑,標(biāo)本采集后30分鐘內(nèi)于2 - 8°C 000 g離心5分鐘,或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
3. 細(xì)胞培養(yǎng)物上清或其它生物標(biāo)本:000g離心20分鐘,取上清即可檢測(cè),或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
注:標(biāo)本溶血會(huì)影響zui后檢測(cè)結(jié)果,因此溶血標(biāo)本不宜進(jìn)行此項(xiàng)檢測(cè)。
標(biāo)本的稀釋原則:
首先通過(guò)文獻(xiàn)檢索的方式了解待測(cè)樣本的大致含量,確定適當(dāng)?shù)南♂尡稊?shù)。只有稀釋至標(biāo)準(zhǔn)曲線的范圍內(nèi),檢測(cè)的結(jié)果才是準(zhǔn)確的。稀釋的過(guò)程中,應(yīng)做好詳細(xì)的記錄。zui后計(jì)算濃度時(shí),稀釋了“N”倍,標(biāo)本的濃度應(yīng)再乘以“N”。
標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋原則:2瓶,每瓶臨用前以樣品稀釋液稀釋至ml,蓋好后靜置0分鐘以上,然后反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解,其濃度為50 U/L,做系列倍比稀釋后,分別稀釋50 U/L,25 U/L,2.5 U/L,6.25 U/L,3.2 U/L,.56 U/L,0.78 U/L,樣品稀釋液直接作為標(biāo)準(zhǔn)濃度0 U/L,臨用前5分鐘內(nèi)配制。
如配制25 U/L標(biāo)準(zhǔn)品:取0.5ml(不要少于0.5ml)50 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含0.5ml樣品稀釋液的Eppendorf
建議檢測(cè)樣品時(shí)均設(shè)雙孔測(cè)定,以保證檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性。如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過(guò)高,請(qǐng)先稀釋后再測(cè)定,計(jì)算時(shí)請(qǐng)zui后乘以稀釋倍數(shù)。ELISA試劑盒-上海谷研生物科技有限公司 Anti-Survivin/RBITC 紅色熒光素羅丹明標(biāo)記 Survivin 蛋白(標(biāo)記)
Anti-Resistin/FITC 熒光素標(biāo)記抵抗素IgG
Anti-TNF-α /Biotin 標(biāo)記 腫瘤壞死因子
Anti-AQP-2/HRP (aquaporin Protein-2) 辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記水通道蛋白-2IgG
Anti-TNF-α /CO-AO 膠體金離子標(biāo)記腫瘤壞死因子
Anti-TNF-α /FITC 熒光素標(biāo)記腫瘤壞死因子IgG
Anti-TNF-α /HRP 辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記腫瘤壞死因子IgG
Anti-TNF-α /RBITC 紅色熒光素標(biāo)記腫瘤壞死因子
Anti-Tubulin-α/FITC 熒光素標(biāo)記微管蛋白αIgG
Anti-Tubulin-γ/FITC 熒光素標(biāo)記微管蛋白-γIgG
Anti-TY3H/FITC (Tyrosine Hydroxylase ) 熒光素標(biāo)記羥化酶IgG
Anti-VCAM-/FITC(CD06) 熒光素標(biāo)記血管內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子IgG
Anti-VEGF/FITC 熒光素標(biāo)記VEGFIgG
Anti-VEGF/RBITC 羅丹明標(biāo)記VEGFIgG
Anti-VEGFR2(VEGF-R2)Flk/FITC 熒光素標(biāo)記血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子受體2IgG
Anti-VIP/FITC 熒光素標(biāo)記血管活性腸肽蛋白IgG
Anti-GAD-65/FITC 熒光素標(biāo)記脫羧酶-65IgG
Anti-Anopheles stephensi protein /FITC 熒光素標(biāo)記硫酯包含蛋白-IgG
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