人真皮成纖維母細(xì)胞-胎兒具體操作
取出凍存管: 根據(jù)細(xì)胞凍存記錄按標(biāo)簽找到所需細(xì)胞的編號(hào)。
從液氮罐中取出細(xì)胞盒,取出所需的細(xì)胞,同時(shí)核對(duì)管外的編號(hào)。
初學(xué)者易犯錯(cuò)誤:水浴鍋未預(yù)熱或者未預(yù)熱到37℃。
水浴鍋內(nèi)凍存管太多,導(dǎo)致傳熱不佳,使融化時(shí)間延長(zhǎng)。
離心前忘記平衡,導(dǎo)致離心機(jī)損壞和細(xì)胞丟失。
一次復(fù)蘇細(xì)胞過(guò)多,忘記更換吸頭和吸管,導(dǎo)致細(xì)胞交叉污染。
實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備:將水浴鍋預(yù)熱至37℃
人真皮成纖維母細(xì)胞-胎兒用75%酒精擦拭紫外線照射30min的超凈工作臺(tái)臺(tái)面。
在超凈工作臺(tái)中按次序擺放好消過(guò)毒的離心管、吸管、培養(yǎng)瓶 等。
迅速解凍:
迅速將凍存管投入到已經(jīng)預(yù)熱的水浴鍋中迅速解凍,并要不斷的搖動(dòng),使管中的液體迅速融化。
.約-2min后
凍存管內(nèi)液體*溶解,取出用酒精棉球擦拭凍存管的外壁,再拿入超凈臺(tái)內(nèi)。
平衡離心:用架盤(pán)天平平衡后,放入離心機(jī)中3000r/min 離心3min
制備細(xì)胞懸液:吸棄上清液。
向離心管內(nèi)加入0ml培養(yǎng)液,吹打制成細(xì)胞懸液。
活化與細(xì)胞復(fù)蘇 收到細(xì)胞株包裹時(shí), 請(qǐng)檢查細(xì)胞株冷凍管是否有解凍情形, 若有請(qǐng)立即通知。細(xì)胞株請(qǐng)盡速開(kāi)始培養(yǎng), 或立即冷凍保存(置于–70 °C, 隔夜后, 移到liq N2)。
細(xì)胞復(fù)蘇的原則-快速融化:必須將凍存在-96℃液氮中的細(xì)胞快速融化至37℃,使細(xì)胞外凍存時(shí)的冰晶迅速融化,避免冰晶緩慢融化時(shí)進(jìn)入細(xì)胞形成再結(jié)晶,對(duì)細(xì)胞造成損害。
細(xì)胞計(jì)數(shù):細(xì)胞濃度以5×05/ml為宜。
培養(yǎng)細(xì)胞將復(fù)合細(xì)胞計(jì)數(shù)要求的細(xì)胞懸液分裝入培養(yǎng)瓶?jī)?nèi),將培養(yǎng)瓶放入37℃和5%CO2的培養(yǎng)箱內(nèi)2-4小時(shí)(或者24-48小時(shí))后換液繼續(xù)培養(yǎng)培養(yǎng),換液的時(shí)間由細(xì)胞情況而定。
公司其他銷(xiāo)量大產(chǎn)品信息:Z004 /秋水仙素/Colchicine 生物技術(shù)級(jí),95%,劇&品 克 進(jìn)分 64-86-8 64-86-8 Colchicine 進(jìn)分
Z0043 秋水仙胺/脫碳/秋水酰胺秋水仙胺/地美可辛/秋水仙酰胺/生物堿F/脫羥/N-脫乙酰-N-甲基/脫羰/秋水仙酰胺/Demecolcine 生物技術(shù)級(jí),98%,&害品 5毫克 進(jìn)分 477-30-5 477-30-5秋水仙胺 秋水仙胺 Demecolcine
Z0044 /消炎痛/茚甲新/-(4-& 甲?;?5-甲氧基--甲基-H-吲哚-3-乙suan"/Indomethacin BR,99%,劇&品 國(guó)產(chǎn) 53-86- 53-86- Indomethacin
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500克 國(guó)產(chǎn)
Z0045 腺苷/腺嘌呤核苷/9-β-D-呋喃核糖基腺嘌呤/腺素苷/胰苷/腺呤配糖/腺尿環(huán)核苷/腺甙/Adenosine 高純,99% 58-6-7 58-6-7腺苷 腺苷 Adenosine
500克
Z0046 環(huán)磷suan"腺苷/環(huán)腺苷suan"/腺苷-3′5′-環(huán)磷suan"/腺苷環(huán)磷suan"酯/腺甙環(huán)磷suan"酯//CAMP 高純,98%,腐蝕品 克 國(guó)產(chǎn) 60-9-4 60-9-4環(huán)磷suan"腺苷 環(huán)磷suan"腺苷 CAMP
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