賽默飛GC-MS/MS測(cè)定動(dòng)物飼料中極低含量的 PCDD/Fs

研究簡(jiǎn)介：隨著近年來(lái)氣相色譜 - 三重四極桿質(zhì)譜 （GC-MS/MS） 聯(lián)用技術(shù)的不斷 發(fā)展，歐盟 644/2017 和 771/2017 法規(guī)允許使用 GC-MS/MS 對(duì)食品和 飼料中的多氯代二噁英 （PCDDs）、多氯代呋喃 （PCDFs）、二噁英 類多氯聯(lián)苯（dl-PCBs）等化合物進(jìn)行確證分析，并控制其“高水平 （Maximum levels, MLs）”和“干預(yù)水平（Action levels, ALs）”。1,2 氣相色譜 - 高分辨率質(zhì)譜 （GC-HRMS）因其高分辨率和高靈敏度，得 以從各種復(fù)雜基質(zhì)干擾中分離出這些強(qiáng)毒性的二噁英化合物。相比而言， 三重四極桿氣質(zhì)聯(lián)用儀 （GC-MS/MS） 的特點(diǎn)則在于其高選擇性是通 過(guò)“母離子—子離子”組成的特征離子對(duì)來(lái)實(shí)現(xiàn)的，GC-MS/MS 能夠獲 取基本不含基質(zhì)干擾的總離子流圖 （TICs）自歐盟法規(guī)在 2014 年允許使用 GC-MS/MS 分析二噁英 以來(lái)，1 靈敏度往往成為顯示 GC-MS/MS 在實(shí)現(xiàn)可靠（并 符合監(jiān)管要求）的二噁英及二噁英類物質(zhì)確證分析的重 要性能指標(biāo)。除靈敏度外，常規(guī)分析中評(píng)價(jià)儀器性能還 需要考慮其他因素，如：樣品質(zhì)量、溶劑體積、和進(jìn)樣 量等，這些因素也將方法 （和系統(tǒng)）在常規(guī)環(huán)境分析中 的適用性。 在本研究中，我們?cè)u(píng)估了配備新型 AEI 離子源的 TSQ 9000 三重四極桿 GC-MS/MS 系統(tǒng)分析溶劑標(biāo)樣和實(shí)際 食品 / 飼料樣品中 PCDD/Fs 的性能。本方法以 EU 法規(guī) 規(guī)定的 1/5 的“高水平（MLs）”為定量限（LOQs）， 充分顯示其能滿足常規(guī)分析中所需的靈敏度、選擇性和 穩(wěn)定性。

 實(shí)驗(yàn)方法：及操作 實(shí)驗(yàn)樣品 動(dòng)物飼料樣品、質(zhì)控樣品和空白樣由列日大學(xué)（ University of Liege）提供。表 1 列出了樣品類型、質(zhì)量和所允許的 大濃度 （ML） 4 。儀器性能測(cè)試、標(biāo)準(zhǔn)曲線和定量使用 EN:1948 的標(biāo)準(zhǔn)溶液 （加拿大惠靈頓實(shí)驗(yàn)室公司） 進(jìn)行 分析。

樣品萃取 樣品制備按照此前文獻(xiàn)描述的提取和凈化方法進(jìn)行。 采用加速溶劑萃取技術(shù)結(jié)合離線多層酸性硅膠柱、 PowerPrepTM 自動(dòng)化系統(tǒng) （FMS 公司） 和三段柱（多 層 ABN 硅膠、 堿性氧化鋁、活性炭）的凈化方法進(jìn)行 樣品前處理，樣品終定容在 10 µL 壬烷中。 本實(shí)驗(yàn)使用的 GC-MS/MS 系統(tǒng)為配備 Thermo ScientificTM TRACETM1310 氣相的 TSQ 9000 三重四極 桿質(zhì)譜儀。液體樣品通過(guò)具有觸底進(jìn)樣功能的 Thermo ScientificTM TriPlusTM RSH 自動(dòng)進(jìn)樣器進(jìn)樣分析。用全 氟三丁胺（PFTBA） 對(duì)質(zhì)譜儀進(jìn)行自動(dòng)調(diào)諧和校正。 質(zhì)譜儀在選擇反應(yīng)監(jiān)測(cè) （SRM） 模式下運(yùn)行，通過(guò) AutoSRM 軟件對(duì)標(biāo)記的和未標(biāo)記 PCDD/F 進(jìn)行離子對(duì) 和碰撞能的優(yōu)化。相關(guān)的氣相和質(zhì)譜條件詳見(jiàn)表 2 和附 錄 A。數(shù)據(jù)的采集、處理和報(bào)告使用 Thermo ScientificTM ChromeleonTM （CDS） 變色龍軟件進(jìn)行。

 方法中分配給待測(cè)化合物的駐留時(shí)間長(zhǎng)于同位素內(nèi)標(biāo)（進(jìn) 樣內(nèi)標(biāo)和回收率標(biāo)）。這是因?yàn)橥凰貥?biāo)記的化合物在樣 品中通常的添加量比待測(cè)化合物高很多。本研究中，通過(guò) 駐留時(shí)間優(yōu)先分配，在確保內(nèi)標(biāo)物有足夠的掃描時(shí)間的同 時(shí) ，使目標(biāo)物分析擁有高的靈敏度。 所 有 GC-MS/MS 和 GC-HRMS 的 對(duì) 比 實(shí) 驗(yàn)， 都 是 基 于 TSQ 9000 GC-MS/MS 上 2 µL SSL 進(jìn)樣與 WatersTM Autospec PremierTM （Milford，USA）上 5 µL PTV 進(jìn)樣的 結(jié)果進(jìn)行的。

 結(jié)果與討論 色譜分析 TraceGOLD TG-Dioxin 色譜柱能完美分離 TCDD/F （圖 1） ，并為 PeCDD/F 的同分異構(gòu)體實(shí)現(xiàn)了符合現(xiàn)行 EU 標(biāo)準(zhǔn)的色譜分離 （圖 2）。

 靈敏度 儀器檢測(cè)限 （IDLs） 通?？梢杂脙煞N方法來(lái)確定 : 通過(guò)計(jì) 算信噪比，或用一系列重復(fù)進(jìn)樣的數(shù)據(jù)來(lái)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。 在 GC-MS/MS 分析中，背景噪音通常很小，因此會(huì)使用 第二種計(jì)算方式。圖 3 顯示了在 TSQ 9000 GC-MS/MS 系 統(tǒng)中通過(guò)對(duì)2，3，7，8-TCDD 溶劑標(biāo)樣進(jìn)行重復(fù)進(jìn)樣（n=8） 得到的 IDL 表現(xiàn)，標(biāo)樣進(jìn)樣濃度相當(dāng)于 柱上 5 fg。

然而，在實(shí)際樣品測(cè)試中這種方法效果并不理想，因?yàn)檎?實(shí)樣品的測(cè)定方法必須使用多個(gè)離子對(duì) ，離子比率及響應(yīng) 因子要求也需要滿足 EU 標(biāo)準(zhǔn)。IDL 附近濃度水平的測(cè)量結(jié) 果具有不確定性，很難滿足這些標(biāo)準(zhǔn)。因此，定義方法的 定量限 （LOQ） 更為合理。

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