如何選擇一款單細(xì)胞挑選儀器

如何選擇一款單細(xì)胞挑選儀器

自從1960年代發(fā)明了熒光激活*（FACS）以來，該方法在研究和醫(yī)學(xué)診斷中得到了廣泛的應(yīng)用。在過去的幾十年中出現(xiàn)了一些新的發(fā)展，包括微型FACS器件的芯片實(shí)驗(yàn)室版本，稱為FACS 3-6。帶有細(xì)胞的移動(dòng)流體在微型通道或直徑為50-400 mm的噴嘴中受到10,000-400,000 Pa的壓力驅(qū)動(dòng)，流速為10 m/s 。FACS中的分類速率可以是每秒10,000個(gè)細(xì)胞或更高。在mFACS中，使用壓電驅(qū)動(dòng)每秒還超過1,000個(gè)細(xì)胞。盡管在近的創(chuàng)新中已經(jīng)證明了有限的空間分辨率， 通常無需對(duì)細(xì)胞成像即可檢測(cè)到細(xì)胞的熒光或散射光。有幾種熒光激活的分選機(jī)制，其中成功的是從噴嘴噴出的包含單個(gè)細(xì)胞的帶電液滴的靜電偏轉(zhuǎn)。所有這些解決方案都是基于流式細(xì)胞儀的，如果細(xì)胞數(shù)量很少，就無法進(jìn)行上述的FACS，更不用說單細(xì)胞操作了。

配備有數(shù)碼相機(jī)的倒置熒光顯微鏡還能夠使用適當(dāng)?shù)膱D像分析軟件自動(dòng)檢測(cè)培養(yǎng)皿中的活熒光細(xì)胞。這種熒光細(xì)胞計(jì)數(shù)是直接的，并且被應(yīng)用于特定的熒光掃描儀或酶標(biāo)儀中。然而，在培養(yǎng)皿或培養(yǎng)板中對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)物的操作要求更高，尤其是在單細(xì)胞水平上。一項(xiàng)稱為CellCelector 的創(chuàng)新儀器，可以使用微量移液器從培養(yǎng)皿中選擇和收集細(xì)胞 。用機(jī)械臂將微量移液器置于先前在顯微鏡載物臺(tái)上檢測(cè)到的細(xì)胞集落上方，并拾取集落或集落的一部分。隨后，機(jī)械臂將微量移液器移至另一個(gè)培養(yǎng)皿上方，將細(xì)胞轉(zhuǎn)移到另一個(gè)培養(yǎng)皿中。CellCelector機(jī)械臂的應(yīng)用導(dǎo)致較低的分類率。盡管已證明該技術(shù)具有分離細(xì)胞集落的能力，但采用這種方法以合理的速度和效率進(jìn)行單細(xì)胞分選似乎并不容易。

使用常規(guī)裝置引入了粘附細(xì)胞的半自動(dòng)顯微注射方法 ，該常規(guī)布置具有相對(duì)于光軸對(duì)角定向并由電動(dòng)顯微操縱器定位的微量移液器。然而，這樣的復(fù)雜設(shè)備不是很劃算，并且很難廣泛使用它們，效率很低。

大多數(shù)細(xì)胞生物學(xué)家的工具箱中仍然缺少圖像控制的自動(dòng)化單細(xì)胞操作，特別是針對(duì)幾百個(gè)細(xì)胞級(jí)別的操作，例如克隆，分選或顯微注射。 Cellsorter系統(tǒng)可以克服在顯微鏡上自動(dòng)進(jìn)行單細(xì)胞操作的技術(shù)難題，它的簡(jiǎn)單性、微量移液器的精確3D定位及其較高的分選效率使Cellsorter具有更高的性價(jià)比。