PCR溫度驗證系統(tǒng)應(yīng)用于計量行業(yè)及第三方校準公司

荷蘭CYCLERtest  PCR溫度驗證系統(tǒng)

     所謂PCR 設(shè)備，實質(zhì)上就是一個溫度控制系統(tǒng)，通過對溫度的控制，在相關(guān)酶和引物存在的條件下使需要檢測基因在體外大量復(fù)制，從而更便捷檢測目標基因的成分和所占比例。統(tǒng)計顯示，PCR 設(shè)備主要應(yīng)用于食品安全，醫(yī)學(xué)臨床診斷，司法刑事，出入境檢驗檢疫等領(lǐng)域。在食品安全檢測領(lǐng)域，通過擴增得到的DNA 樣本，可以準確判細菌、病毒及微生物的存在情況以及相應(yīng)的處理辦法方法。而準確判斷的基礎(chǔ)是確保PCR 設(shè)備工作在穩(wěn)定的狀態(tài)。大多數(shù)情況下，實驗人員對試劑和耗材都會加以有效控制，而PCR 溫度準確性這一因素往往被忽略掉，但這恰好是PCR 試驗中非常重要的。例如，由于PCR 設(shè)備的溫度偏差沒有得到有效準確的控制導(dǎo)致檢測結(jié)果由陽性變成陰性，或者被測食品中的病毒數(shù)量比檢測報告中要多等，這些錯誤判斷都將會引起很多不可逆轉(zhuǎn)的后果?？傊?，只有對各個影響因素準確控制，PCR 實驗才能達到高準確性和高重復(fù)性。

     在基因擴增的過程中，因為相關(guān)酶的活性受到溫度的影響很大，對DNA 復(fù)制起關(guān)鍵作用的幾個溫度點的準確控制顯得格外重要。溫度過高時，酶的活性受到抑制，基因不僅不能很好的解鏈，還有可能滅活。對于一個系統(tǒng)來說，溫度的不確定性來自于以下幾個方面：首先，對于PCR 設(shè)備來說，設(shè)定的溫度值與實際的溫度之間總會有差別，各孔間溫度也不一樣，一些PCR 設(shè)備溫度控制性能的不足造成的后果是：當PCR 設(shè)備的模塊溫度在升溫時，溫度過沖或不足，不能準確的達到預(yù)設(shè)的平臺溫度。其次，實驗儀器老化也會導(dǎo)致系統(tǒng)溫度變化，由此產(chǎn)生溫控系統(tǒng)失常導(dǎo)致實驗失敗也是不可忽略的因素。因此，實時監(jiān)測PCR 設(shè)備的溫度控制性能是重要的，這一點傳統(tǒng)的檢測設(shè)備是達不到的。另外一點，外部因素對實驗結(jié)果的影響。不同PCR 設(shè)備品牌與型號在溫度控制性能上的不同直接影響了溫度的準確性和不均一性，因而影響了整個PCR 反應(yīng)的實驗結(jié)果。對于實時PCR，熒光信號輸出和產(chǎn)量/溶解曲線，直接與溫度控制有關(guān)系，而這些結(jié)果很可能是毀滅性的。目前，全國范圍內(nèi)的PCR 設(shè)備很多都是生產(chǎn)設(shè)備廠家自檢，這樣的話缺少真正的公平性，而且很多廠家只對PCR 設(shè)備的其中一個溫度點進行檢測，這樣*不能顧及到溫場的均勻性，嚴格意義上來講，這樣的做法是非常不可取的。甚至還有一部分設(shè)備使用者不清楚PCR 設(shè)備是否需要檢定。

  基于以上論述的幾點因素，找到一個實時準確的檢測系統(tǒng)是一個迫在眉睫的問題，幸運的是，PCR溫度驗證系統(tǒng)的出現(xiàn)可以為我們解決這個棘手的問題。該系統(tǒng)由硬件和軟件兩個主要部分組成，硬件主要包括高精度的熱敏電阻和信號轉(zhuǎn)換器，高精度的熱敏電阻是測量準確的必要前提。軟件使用方便且易操作，多種檢測程序滿足不同客戶需求，檢測過程直觀明了，自動生成檢測報告，事后可以回放所有記錄檢測數(shù)據(jù)。軟件可以儲存每一次測量的結(jié)果，很容易重新閱讀。結(jié)果顯示所有的參數(shù)及參數(shù)的細節(jié)，包括性、升溫時間、大過沖，平均過沖和溫度持續(xù)時間等。不僅如此，檢測人員還可以通過設(shè)定觀察儀器的性能進程。通過驗證系統(tǒng)，把PCR 設(shè)備工作工程中抽象的溫度特性簡潔直觀的體現(xiàn)出來。實驗者可以更方便的找出實驗問題的所在，減少試劑和耗材的浪費，更好的提高產(chǎn)品的質(zhì)量。

目前行業(yè)現(xiàn)狀：

    由于政策調(diào)整，把一些政府職能轉(zhuǎn)化到市場中去，PCR溫度驗證系統(tǒng)正走向市場化，第三方檢測公司如雨后春筍一般，而且行業(yè)的需求正進一步增加。誰能搶先一步，就能搶先遲到行業(yè)內(nèi)的塊大蛋糕。

我們的PCR溫度驗證儀目前在全國*系統(tǒng)已經(jīng)售出70多套，是*符合《JJF1527-2015聚合酶鏈反應(yīng)分析儀校準規(guī)范》技術(shù)規(guī)范要求，也可以說是*按照此儀器而進行的優(yōu)化檢測技術(shù)規(guī)范。