不管是從應(yīng)用還是制備,多克隆抗體與單克隆抗體都有很大區(qū)別

2022

07-02

22:00:02

 152

來源：化工儀器網(wǎng)

　　多克隆抗體就是用一種包含多種抗原決定簇的抗原免疫動(dòng)物，刺激機(jī)體多個(gè)B細(xì)胞克隆產(chǎn)生針對多種抗原表位的不同抗體后，所獲得的免疫血清實(shí)際上是含有多種抗體的混合物。由一種抗原決定簇刺激機(jī)體，由一個(gè)B淋巴細(xì)胞接受該抗原刺激所產(chǎn)生的抗體稱之為單克隆抗體。由多種抗原決定簇刺激機(jī)體，相應(yīng)地就產(chǎn)生各種各樣的單克隆抗體，這些單克隆抗體混雜在一起就是多克隆抗體。

　　多克隆抗體與單克隆抗體的應(yīng)用比較

　　（1）多克隆抗體的應(yīng)用

　　一種良好的多克隆抗血清含有抗某種抗原不同表位的多種抗體。由于多克隆抗血清通常包含抗某一抗原的不同表位的抗體，包括變性—抗性的表位，所以，在深固定的樣本中也會(huì)發(fā)揮效應(yīng)，在石蠟包埋組織切片的染色中，多克隆抗體常選用。根據(jù)實(shí)驗(yàn)的不同需要，多克隆抗體應(yīng)用于相應(yīng)抗原的標(biāo)記。此外，在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中，多克隆抗體被用于農(nóng)藥殘留現(xiàn)場監(jiān)測；在臨床應(yīng)用中，多克隆抗體主要用于病原物的檢測、疾病的診斷及治療，如作為蛋白類免疫抑制劑用于移植反應(yīng)和自身免疫病的治療。

　?。?）單克隆抗體的應(yīng)用

　　單克隆抗體可用于分析抗原的細(xì)微結(jié)構(gòu)及檢驗(yàn)抗原抗體未知的結(jié)構(gòu)關(guān)系；生產(chǎn)出針對復(fù)雜生物混合物中的特定分子的抗體，可用于分離、分析及純化該特定分子抗原；其試劑可用于臨床診斷和治療，或用于以單抗為彈頭的藥物，直接導(dǎo)向腫瘤等。自Mathe于1958年*將抗鼠白血病免疫球蛋白與氨甲喋呤(MTX)交聯(lián)用于導(dǎo)向治療以來，相繼出現(xiàn)了多種*藥物與各種抗體的免疫耦合物，藥物與單抗直接交聯(lián)、藥物通過小分子交聯(lián)劑與單抗連接及藥物通過大分子載體與單抗相連形成免疫耦合物，促進(jìn)了分子導(dǎo)向藥物的研制工作從實(shí)驗(yàn)室走向臨床并廣泛應(yīng)用于疾病治療。

　　多克隆抗體與單克隆抗體的制備比較

　　多克隆抗體制備的主要流程包括：①制備抗原；②選擇實(shí)驗(yàn)動(dòng)物；③動(dòng)物免疫；④試取血進(jìn)行測試，看看是否成功免疫；⑤如果成功免疫，處死實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，采集全部血清；⑥純化出抗體；⑦鑒定抗體，包括純度以及特異性。

　　與單抗制備的區(qū)別經(jīng)過特定抗原處理過的B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞通過細(xì)胞融合的方法得到雜交瘤細(xì)胞，經(jīng)HAT培養(yǎng)基篩選、ELISA檢測效價(jià)后就得到陽性克隆株，后進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)或?qū)⒓?xì)胞注入到動(dòng)物（一般為balb/c小鼠）腹腔中用腹水培養(yǎng)，收集上清/腹水純化后就能得到單克隆抗體。而制備多克隆抗體就沒有單克隆抗體繁瑣，只需將抗原（純度越高越好）直接注入到動(dòng)物體內(nèi)進(jìn)行免疫，經(jīng)過3至4次免疫，ELISA測其效價(jià)合格后，收集血液離心得到上清，純化后即能得到多克隆抗體。因此多抗制備的周期就比單抗制備的短，*制備價(jià)格也比單抗要低。

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