重組蛋白真核表達(dá)系統(tǒng)技術(shù)平臺的特色

2022

07-02

22:00:02

 79

來源：化工儀器網(wǎng)

　　重組蛋白作為生物制藥在醫(yī)學(xué)中作用顯著，一般用轉(zhuǎn)基因動物的乳腺產(chǎn)生。重組蛋白真核表達(dá)包括酵母表達(dá)系統(tǒng)、桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞表達(dá)系統(tǒng)、腺病毒表達(dá)系統(tǒng)等。一般可以正確折疊，包含各種修改。但是價格高，周期長。

　　重組蛋白真核表達(dá)系統(tǒng)技術(shù)平臺的特色

　　快速、highly-stringent篩選：只篩選到高表達(dá)穩(wěn)定株；4～5個月獲得穩(wěn)定高表達(dá)細(xì)胞株（常規(guī)方法要9～12個月）

　　高效表達(dá)：*啟動子和*分泌信號肽，很容易達(dá)到30p/c/d/以上（傳統(tǒng)方法需要用藥物篩選9～11輪以上才能達(dá)到）

　　穩(wěn)定表達(dá)：表達(dá)質(zhì)粒上的AGE穩(wěn)定子，能夠抑制染色體gene silencing，保障細(xì)胞株的長時間穩(wěn)定表達(dá)

　　用GS篩選：質(zhì)粒上有*合成酶(GS)基因，可以做為備選篩選標(biāo)記，也可以直接用MSX加壓篩選，顯著提高重組蛋白的表達(dá)產(chǎn)率；

　　高產(chǎn)率：單克隆細(xì)胞株在普通搖瓶里的蛋白表達(dá)量已能達(dá)到1.5～2克/升

　　工藝放大優(yōu)化潛力：經(jīng)工藝放大優(yōu)化（Process Development）后，蛋白產(chǎn)量可提高5-10倍以上。本表達(dá)系統(tǒng)可容易達(dá)到3～5克/升的蛋白的產(chǎn)量。較大地節(jié)約生產(chǎn)成本。

　　目前的表達(dá)系統(tǒng)各有利弊，但一般理想的表達(dá)系統(tǒng)滿足以下幾點(diǎn)：一是特異性，不受其他內(nèi)源性因素影響，只能通過外源性無毒物激活。二是不干擾，不干擾細(xì)胞通路。以及誘導(dǎo)劑的誘導(dǎo)性、生物利用度、可塑性和劑量依賴性。

　　因此，在選擇表達(dá)系統(tǒng)時，必須充分考慮各種因素，如蛋白質(zhì)性質(zhì)、實(shí)驗(yàn)條件、生產(chǎn)成本、表達(dá)水平和安全性。權(quán)衡利弊后，選擇相應(yīng)的表達(dá)系統(tǒng)。

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