HEp-2細胞| HEp-2人喉表皮樣癌細胞 處理方法

HEp-2細胞| HEp-2人喉表皮樣癌細胞      處理方法

素冉生物依托同濟大學(xué)，上海市東方醫(yī)院，上海市di一婦嬰保健院供應(yīng)人臍帶間充質(zhì)干細胞，人脂肪干細胞，無血清細胞凍存液，IPS功能性細胞，HUVEC細胞，各類細胞株細胞系，所有人源細胞均STR鑒定后入庫。并供應(yīng)各類血清，培養(yǎng)基，*，雙抗，*培養(yǎng)基等。

產(chǎn)品名稱：HEp-2細胞

中文名稱：人喉表皮樣癌細胞

規(guī)格：T25瓶

形態(tài)特征：上皮細胞樣

生長狀態(tài)：貼壁生長

是否STR鑒定：

培養(yǎng)條件：RPMI-1640(GIBCO, 添加NaHCO3 1.5g/L, glucose 2.5g/L, Sodium Pyruvate 0.11g/L)，80%；胎牛血清，20%。氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。溫度：37攝氏度。（*HAKATA優(yōu)等胎牛血清貨號：HN-FBS-500）

傳代方法：1：2傳代

凍存條件：HAKATA ® 無血清細胞凍存液貨號：H-W-100 規(guī)格：100ML

支原體檢測：陰性

使用權(quán)限：A類

參考文獻：16，17；D19S433：13，14；D21S11：27，28；D2S1338：17；D3S1358：15，18；D5S818：11，12；D7S820：8，12；D8S1179：12，13；FGA：18，21；TH01：7；TPOX：8，12；vWA：16，18；

復(fù)蘇周期：10個工作日左右

培養(yǎng)步驟：

1）復(fù)蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入5mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加4-6mL*培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓毎麘乙杭尤?cm皿中），培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。

2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。

1、對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：

1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。

2. 加1-2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的*培養(yǎng)基終止消化。

3.輕輕吹打細胞，*脫落后吸出，在1000RPM條件下離心8-10分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。

4. 按5-6ml/瓶補加培養(yǎng)液，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中。

PS：若客戶收到2ml小管細胞，收到細胞后，用75%酒精噴灑整個管子消毒后放到超凈臺或安全柜內(nèi)，嚴格無菌操作；將小管細胞轉(zhuǎn)移至T25培養(yǎng)瓶或6cm培養(yǎng)皿，加入5ml左右*培養(yǎng)基混勻，放入培養(yǎng)箱過夜培養(yǎng)后查看細胞密度：若密度未超過80%，換液繼續(xù)培養(yǎng)，視情況傳代或者凍存。若密度超過80%，可直接進行傳代（方法同上）。

2、對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細胞，1000RPM條件下離心8-10分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細胞懸起，將細胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

3）細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后加入少量*，細胞變圓脫落后，進行離心收集，1000RPM條件下離心8-10分鐘，去除上清，按凍存數(shù)量加入血清及DMSO，凍存比例為90%FBS+10%DMSO。

PS：若客戶收到2ml小管細胞，收到細胞后，用75%酒精噴灑整個管子消毒后放到超凈臺或安全柜內(nèi)，嚴格無菌操作；將小管細胞轉(zhuǎn)移至T25培養(yǎng)瓶或6cm培養(yǎng)皿，加入5ml左右*培養(yǎng)基混勻，放入培養(yǎng)箱過夜培養(yǎng)后查看細胞密度：若密度未超過80%，換液繼續(xù)培養(yǎng)，視情況傳代或者凍存。若密度超過80%，可直接進行傳代（方法同上）。

處理方法：

1. 收到細胞先不開瓶蓋，瓶身擦拭酒精后放在培養(yǎng)箱靜置若干小時（視細胞密度而定）穩(wěn)定細胞狀態(tài)。接著在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數(shù)拍照（建議收細胞時就整體外觀拍一張照片，觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況，隨后在顯微鏡下拍下細胞狀態(tài)，100×，200×各一張），觀察記錄細胞在運輸過程中是否有污染情況。作為我方進行售后的依據(jù)。

2. 收到細胞未開封，出現(xiàn)污染狀況我們負責(zé)免費重發(fā)一次細胞。

3. 由于細胞狀態(tài)受環(huán)境、操作和運輸?shù)榷喾矫嬉蛩氐挠绊?，故本公司只保證客戶收到細胞后一周內(nèi)的細胞狀態(tài)，故客戶需要售后是需出示收到細胞的時間證明及客戶提供收貨時間和發(fā)現(xiàn)問題后與客服人員溝通的時間證明，期間間隔時間不能大于7天。

4. 如客戶對細胞的種類、純度、活性等特性有疑問，需提供相應(yīng)的生物學(xué)實驗檢測結(jié)果作為依據(jù)。

備注：各位老師收到后用無菌離心管收集瓶中培養(yǎng)基，留作過渡培養(yǎng)

人T細胞白血病細胞;6T-CEM   人T細胞白血病細胞;6T-CEM   T25

人急性淋巴細胞白血病細胞;CEM/C1 人急性淋巴細胞白血病細胞;CEM/C1 T25

TC-1    小鼠肺上皮細胞  T25

DT40    DT40（雞淋巴瘤細胞) T25

DC2.4   DC2.4   T25

HT22小鼠海馬神經(jīng)元細胞系    HT22小鼠海馬神經(jīng)元細胞系    T25

HBMEC人腦微血管內(nèi)皮細胞 HBMEC人腦微血管內(nèi)皮細胞 T25

小鼠肝癌22(H22) 小鼠肝癌22(H22) T25

ID8 ID8小鼠卵巢癌細胞   T25

KYSE-14 人食管鱗癌細胞；KYSE-140    T25

 Hs578bst   人正常乳腺細胞  T25

TU 686  人喉癌細胞 TU 686  T25

Ketr-3  人腎癌細胞  T25

SNU-216 SNU-216;人胃癌細胞  T25

U373    人腦膠質(zhì)瘤細胞  T25

U343    人腦膠質(zhì)瘤細胞  T25

tpc-1   人甲狀腺乳頭狀細胞tpc-1 T25

MDBK    MDBK；牛腎細胞  T25

NCI-H157    人非小細胞肺腺癌細胞    T25

TU212   人喉癌細胞,TU212細胞    T25

SV-HUC-1    人膀胱上皮永生化細胞    T25

SNB-19  人膠質(zhì)瘤細胞    T25

Bcpap   人甲狀腺癌乳頭狀細胞    T25

K1  人甲狀腺癌細胞  T25

KCL-22  人慢性粒細胞白血病細胞  T25

c918    人眼脈絡(luò)黑色瘤細胞胞   

HCT116/L    人結(jié)腸癌耐*耐藥株    T25

5-8F    鼻咽癌細胞株    T25

RS1 大鼠皮膚成纖維樣細胞；RS1   T25

人肝癌細胞；Li-7    人肝癌細胞；Li-7    T25

人胚肺成纖維細胞；IMR-90    人胚肺成纖維細胞；IMR-90    T25

鼠小腦細胞英文名：C8-D1A    鼠小腦細胞英文名：C8-D1A    T25

C2C12 小鼠胚胎肌母  小鼠胚胎肌母細胞    T25

UWB1.289 (ATCC® CRL-2945™)  UWB1.289 (ATCC® CRL-2945™)  T25

UWB1.289+BRCA1 (ATCC® CRL-2946™)    UWB1.289+BRCA1 (ATCC® CRL-2946™)    T25

小鼠胰腺癌細胞（B類）；Pan02 小鼠胰腺癌細胞（B類）；Pan02 T25

hs 68   男性正常gui頭細胞系 HS68  T25

HELF人胚肺成纖維細胞    HELF人胚肺成纖維細胞    T25

Hs888Lu Hs888Lu T25

HS 1.Tes    HS 1.Tes人正常睪丸細胞  T25

PC-3M   PC-3M人前列腺癌細胞 T25

TE354.T TE354.T人皮膚基底細胞癌 T25

 SW839?  SW839?人腎癌細胞    T25

KMB-17  *系KMB-17    T25

HT-3    HT-3人子宮頸癌細胞  T25

6-10b   鼻咽癌細胞株    T25

DCS 小鼠樹突狀細胞肉瘤細胞；DCS T25

MFC 小鼠前胃癌細胞  T25

Walker/LLC-WRC 256  大鼠腹水癌細胞  T25

lewis/luc   小鼠肺癌細胞-熒光   T25

RM-1    小鼠前列腺癌細胞    T25

MA104   羅猴胎腎細胞    T25

TTA1    人甲狀腺癌細胞  T25

ACT-1   人甲狀腺癌細胞  T25

CAL-62  人甲狀腺癌細胞  T25

BHT101  人甲狀腺癌細胞  T25

HTh-7   人甲狀腺癌細胞  T25

Hth83   人甲狀腺癌細胞  T25

KHM-5M  人甲狀腺癌細胞  T25

KMH-2   人甲狀腺癌細胞  T25

KTC-1   人甲狀腺癌細胞  T25

Ocut-2C 人甲狀腺癌細胞  T25

C643    人甲狀腺癌細胞  T25

Nthy-ori 3-1    人甲狀腺正常細胞    T25

SW 982 [SW-982, SW982]  人滑膜肉瘤細胞  T25

h22/luc 小鼠肝癌細胞H22標記luciferase  T25

HDF-a   人皮膚成纖維    T25

HFF-1   人皮膚成纖維    T25

ZR-75-30    ZR-75-30 人乳腺癌細胞   T25

E0771   E0771 小鼠乳腺癌細胞    T25

HCE-T   HCE-T人角膜上皮細胞 T25

GL261   GL261小鼠膠質(zhì)瘤細胞 T25

C666-1  C666-1; 人鼻咽癌細胞    T25

RLE-6TN RLE-6TN;大鼠肺泡Ⅱ型細胞    T25

RSC96   大鼠雪旺細胞;RSC96  T25

HL-1    小鼠心肌細胞    T25

PANC02  小鼠胰腺癌細胞  T25

MLE-12  小鼠肺泡上皮細胞 MLE-12 T25

S-180   S-180小鼠腹水瘤細胞 T25

SP2/0   SP2/0小鼠骨髓瘤細胞 T25

K7M2 wt [K7M2-WT]   K7M2 wt [K7M2-WT]小鼠骨肉瘤成骨細胞 T25

ACC-2   人涎腺腺樣囊性癌細胞；ACC-2 T25

CCC-ESF-1   人胚皮膚成纖維細胞；CCC-ESF-1   T25

UMR-106 UMR-106大鼠骨肉瘤細胞   T25

hCMEC/D3    hCMEC/D3(永生化人腦微血管內(nèi)皮細胞)  T25

HMC3    人小膠質(zhì)細胞;HMC3   T25

ZR-75-30    ZR-75-30 人乳腺癌細胞   T25

LLC/LUC 小鼠肺癌細胞帶熒光素酶  T25

4T1/LUC 小鼠乳腺癌細胞帶熒光素酶    T25

mda-mb-231/luc  人乳腺癌細胞帶熒光素酶  T25

A549/GFP    人肺癌細胞帶綠色熒光    T25

CT26.WT/LUC 小鼠結(jié)腸癌細胞帶熒光素酶    T25

143B/LUC    人骨肉瘤細胞帶熒光素酶  T25

SMMC7721/GFP    人肝癌細胞帶綠色熒光    T25

P815    小鼠肥大細胞瘤細胞；P815    T25

HKC 人腎小管上皮細胞；HKC  T25

HUVEC   人臍靜脈血管內(nèi)皮細胞;HUVEC  T25

ARO 人甲狀腺癌細胞ARO   T25

FRO 人甲狀腺癌細胞FRO   T25

KGN 人卵巢顆粒細胞 KGN  T25

SUM159PT    SUM159PT 人乳腺癌細胞   T25

MMQ 大鼠垂體瘤細胞；MMQ T25

IOSE-80 人正常卵巢上皮細胞 IOSE-80  T25

OVCA-429    人卵巢癌細胞OVCA-429    T25

KNS-89  KNS-89人腦膠質(zhì)細胞瘤細胞    T25