RKO細(xì)胞| RKO人結(jié)腸癌細(xì)胞（低分化 處理方法

RKO細(xì)胞| RKO人結(jié)腸癌細(xì)胞（低分化    處理方法

素冉生物依托同濟(jì)大學(xué)，上海市東方醫(yī)院，上海市di一婦嬰保健院供應(yīng)人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞，人脂肪干細(xì)胞，無(wú)血清細(xì)胞凍存液，IPS功能性細(xì)胞，HUVEC細(xì)胞，各類細(xì)胞株細(xì)胞系，所有人源細(xì)胞均STR鑒定后入庫(kù)。并供應(yīng)各類血清，培養(yǎng)基，*，雙抗，*培養(yǎng)基等。

產(chǎn)品名稱：RKO細(xì)胞

中文名稱：人結(jié)腸癌細(xì)胞（低分化

規(guī)格：T25瓶

形態(tài)特征：上皮樣

生長(zhǎng)狀態(tài)：貼壁生長(zhǎng)

是否STR鑒定：

培養(yǎng)條件：DMEM(高糖）+10%FBS（*HAKATA優(yōu)等胎牛血清 貨號(hào)：HN-FBS-500）

傳代方法：消化3-5分鐘。1:2。3天內(nèi)可長(zhǎng)滿。

凍存條件：HAKATA ® 無(wú)血清細(xì)胞凍存液貨號(hào)：H-W-100 規(guī)格：100ML

支原體檢測(cè)：陰性

使用權(quán)限：A類

參考文獻(xiàn)：Amelogenin：X,X；CSF1PO：8,10；D12S391：15,20；D13S317：8,11；D16S539：13,13；D18S51：11,12；D19S433：14,14；D21S11：27,30；D2S1338：16,16；D3S1358：16,19；D5S818：11,13；D6S1043：14.1,19；D7S820：8,10；D8S1179：9,13,14；FGA：20,21,22,23；Penta E：11,13；TH01：6,10；TPOX：11,11；vWA：16,22；

復(fù)蘇周期：10個(gè)工作日左右

培養(yǎng)步驟：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入5mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加4-6mL*培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入6cm皿中），培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

1、對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。

2. 加1-2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的*培養(yǎng)基終止消化。

3.輕輕吹打細(xì)胞，*脫落后吸出，在1000RPM條件下離心8-10分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。

4. 按5-6ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)液，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中。

PS：若客戶收到2ml小管細(xì)胞，收到細(xì)胞后，用75%酒精噴灑整個(gè)管子消毒后放到超凈臺(tái)或安全柜內(nèi)，嚴(yán)格無(wú)菌操作；將小管細(xì)胞轉(zhuǎn)移至T25培養(yǎng)瓶或6cm培養(yǎng)皿，加入5ml左右*培養(yǎng)基混勻，放入培養(yǎng)箱過(guò)夜培養(yǎng)后查看細(xì)胞密度：若密度未超過(guò)80%，換液繼續(xù)培養(yǎng)，視情況傳代或者凍存。若密度超過(guò)80%，可直接進(jìn)行傳代（方法同上）。

2、對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM條件下離心8-10分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后加入少量*，細(xì)胞變圓脫落后，進(jìn)行離心收集，1000RPM條件下離心8-10分鐘，去除上清，按凍存數(shù)量加入血清及DMSO，凍存比例為90%FBS+10%DMSO。

PS：若客戶收到2ml小管細(xì)胞，收到細(xì)胞后，用75%酒精噴灑整個(gè)管子消毒后放到超凈臺(tái)或安全柜內(nèi)，嚴(yán)格無(wú)菌操作；將小管細(xì)胞轉(zhuǎn)移至T25培養(yǎng)瓶或6cm培養(yǎng)皿，加入5ml左右*培養(yǎng)基混勻，放入培養(yǎng)箱過(guò)夜培養(yǎng)后查看細(xì)胞密度：若密度未超過(guò)80%，換液繼續(xù)培養(yǎng)，視情況傳代或者凍存。若密度超過(guò)80%，可直接進(jìn)行傳代（方法同上）。

處理方法：

1. 收到細(xì)胞先不開(kāi)瓶蓋，瓶身擦拭酒精后放在培養(yǎng)箱靜置若干小時(shí)（視細(xì)胞密度而定）穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。接著在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況，并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照（建議收細(xì)胞時(shí)就整體外觀拍一張照片，觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況，隨后在顯微鏡下拍下細(xì)胞狀態(tài)，100×，200×各一張），觀察記錄細(xì)胞在運(yùn)輸過(guò)程中是否有污染情況。作為我方進(jìn)行售后的依據(jù)。

2. 收到細(xì)胞未開(kāi)封，出現(xiàn)污染狀況我們負(fù)責(zé)免費(fèi)重發(fā)一次細(xì)胞。

3. 由于細(xì)胞狀態(tài)受環(huán)境、操作和運(yùn)輸?shù)榷喾矫嬉蛩氐挠绊?，故本公司只保證客戶收到細(xì)胞后一周內(nèi)的細(xì)胞狀態(tài)，故客戶需要售后是需出示收到細(xì)胞的時(shí)間證明及客戶提供收貨時(shí)間和發(fā)現(xiàn)問(wèn)題后與客服人員溝通的時(shí)間證明，期間間隔時(shí)間不能大于7天。

4. 如客戶對(duì)細(xì)胞的種類、純度、活性等特性有疑問(wèn)，需提供相應(yīng)的生物學(xué)實(shí)驗(yàn)檢測(cè)結(jié)果作為依據(jù)。

備注：各位老師收到后用無(wú)菌離心管收集瓶中培養(yǎng)基，留作過(guò)渡培養(yǎng)

人T細(xì)胞白血病細(xì)胞;6T-CEM   人T細(xì)胞白血病細(xì)胞;6T-CEM   T25

人急性淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞;CEM/C1 人急性淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞;CEM/C1 T25

TC-1    小鼠肺上皮細(xì)胞  T25

DT40    DT40（雞淋巴瘤細(xì)胞) T25

DC2.4   DC2.4   T25

HT22小鼠海馬神經(jīng)元細(xì)胞系    HT22小鼠海馬神經(jīng)元細(xì)胞系    T25

HBMEC人腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞 HBMEC人腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞 T25

小鼠肝癌22(H22) 小鼠肝癌22(H22) T25

ID8 ID8小鼠卵巢癌細(xì)胞   T25

KYSE-14 人食管鱗癌細(xì)胞；KYSE-140    T25

 Hs578bst   人正常乳腺細(xì)胞  T25

TU 686  人喉癌細(xì)胞 TU 686  T25

Ketr-3  人腎癌細(xì)胞  T25

SNU-216 SNU-216;人胃癌細(xì)胞  T25

U373    人腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞  T25

U343    人腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞  T25

tpc-1   人甲狀腺乳頭狀細(xì)胞tpc-1 T25

MDBK    MDBK；牛腎細(xì)胞  T25

NCI-H157    人非小細(xì)胞肺腺癌細(xì)胞    T25

TU212   人喉癌細(xì)胞,TU212細(xì)胞    T25

SV-HUC-1    人膀胱上皮永生化細(xì)胞    T25

SNB-19  人膠質(zhì)瘤細(xì)胞    T25

Bcpap   人甲狀腺癌乳頭狀細(xì)胞    T25

K1  人甲狀腺癌細(xì)胞  T25

KCL-22  人慢性粒細(xì)胞白血病細(xì)胞  T25

c918    人眼脈絡(luò)黑色瘤細(xì)胞胞   

HCT116/L    人結(jié)腸癌耐*耐藥株    T25

5-8F    鼻咽癌細(xì)胞株    T25

RS1 大鼠皮膚成纖維樣細(xì)胞；RS1   T25

人肝癌細(xì)胞；Li-7    人肝癌細(xì)胞；Li-7    T25

人胚肺成纖維細(xì)胞；IMR-90    人胚肺成纖維細(xì)胞；IMR-90    T25

鼠小腦細(xì)胞英文名：C8-D1A    鼠小腦細(xì)胞英文名：C8-D1A    T25

C2C12 小鼠胚胎肌母  小鼠胚胎肌母細(xì)胞    T25

UWB1.289 (ATCC® CRL-2945™)  UWB1.289 (ATCC® CRL-2945™)  T25

UWB1.289+BRCA1 (ATCC® CRL-2946™)    UWB1.289+BRCA1 (ATCC® CRL-2946™)    T25

小鼠胰腺癌細(xì)胞（B類）；Pan02 小鼠胰腺癌細(xì)胞（B類）；Pan02 T25

hs 68   男性正常gui頭細(xì)胞系 HS68  T25

HELF人胚肺成纖維細(xì)胞    HELF人胚肺成纖維細(xì)胞    T25

Hs888Lu Hs888Lu T25

HS 1.Tes    HS 1.Tes人正常睪丸細(xì)胞  T25

PC-3M   PC-3M人前列腺癌細(xì)胞 T25

TE354.T TE354.T人皮膚基底細(xì)胞癌 T25

 SW839?  SW839?人腎癌細(xì)胞    T25

KMB-17  *系KMB-17    T25

HT-3    HT-3人子宮頸癌細(xì)胞  T25

6-10b   鼻咽癌細(xì)胞株    T25

DCS 小鼠樹(shù)突狀細(xì)胞肉瘤細(xì)胞；DCS T25

MFC 小鼠前胃癌細(xì)胞  T25

Walker/LLC-WRC 256  大鼠腹水癌細(xì)胞  T25

lewis/luc   小鼠肺癌細(xì)胞-熒光   T25

RM-1    小鼠前列腺癌細(xì)胞    T25

MA104   羅猴胎腎細(xì)胞    T25

TTA1    人甲狀腺癌細(xì)胞  T25

ACT-1   人甲狀腺癌細(xì)胞  T25

CAL-62  人甲狀腺癌細(xì)胞  T25

BHT101  人甲狀腺癌細(xì)胞  T25

HTh-7   人甲狀腺癌細(xì)胞  T25

Hth83   人甲狀腺癌細(xì)胞  T25

KHM-5M  人甲狀腺癌細(xì)胞  T25

KMH-2   人甲狀腺癌細(xì)胞  T25

KTC-1   人甲狀腺癌細(xì)胞  T25

Ocut-2C 人甲狀腺癌細(xì)胞  T25

C643    人甲狀腺癌細(xì)胞  T25

Nthy-ori 3-1    人甲狀腺正常細(xì)胞    T25

SW 982 [SW-982, SW982]  人滑膜肉瘤細(xì)胞  T25

h22/luc 小鼠肝癌細(xì)胞H22標(biāo)記luciferase  T25

HDF-a   人皮膚成纖維    T25

HFF-1   人皮膚成纖維    T25

ZR-75-30    ZR-75-30 人乳腺癌細(xì)胞   T25

E0771   E0771 小鼠乳腺癌細(xì)胞    T25

HCE-T   HCE-T人角膜上皮細(xì)胞 T25

GL261   GL261小鼠膠質(zhì)瘤細(xì)胞 T25

C666-1  C666-1; 人鼻咽癌細(xì)胞    T25

RLE-6TN RLE-6TN;大鼠肺泡Ⅱ型細(xì)胞    T25

RSC96   大鼠雪旺細(xì)胞;RSC96  T25

HL-1    小鼠心肌細(xì)胞    T25

PANC02  小鼠胰腺癌細(xì)胞  T25

MLE-12  小鼠肺泡上皮細(xì)胞 MLE-12 T25

S-180   S-180小鼠腹水瘤細(xì)胞 T25

SP2/0   SP2/0小鼠骨髓瘤細(xì)胞 T25

K7M2 wt [K7M2-WT]   K7M2 wt [K7M2-WT]小鼠骨肉瘤成骨細(xì)胞 T25

ACC-2   人涎腺腺樣囊性癌細(xì)胞；ACC-2 T25

CCC-ESF-1   人胚皮膚成纖維細(xì)胞；CCC-ESF-1   T25

UMR-106 UMR-106大鼠骨肉瘤細(xì)胞   T25

hCMEC/D3    hCMEC/D3(永生化人腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞)  T25

HMC3    人小膠質(zhì)細(xì)胞;HMC3   T25

ZR-75-30    ZR-75-30 人乳腺癌細(xì)胞   T25

LLC/LUC 小鼠肺癌細(xì)胞帶熒光素酶  T25

4T1/LUC 小鼠乳腺癌細(xì)胞帶熒光素酶    T25

mda-mb-231/luc  人乳腺癌細(xì)胞帶熒光素酶  T25

A549/GFP    人肺癌細(xì)胞帶綠色熒光    T25

CT26.WT/LUC 小鼠結(jié)腸癌細(xì)胞帶熒光素酶    T25

143B/LUC    人骨肉瘤細(xì)胞帶熒光素酶  T25

SMMC7721/GFP    人肝癌細(xì)胞帶綠色熒光    T25

P815    小鼠肥大細(xì)胞瘤細(xì)胞；P815    T25

HKC 人腎小管上皮細(xì)胞；HKC  T25

HUVEC   人臍靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞;HUVEC  T25

ARO 人甲狀腺癌細(xì)胞ARO   T25

FRO 人甲狀腺癌細(xì)胞FRO   T25

KGN 人卵巢顆粒細(xì)胞 KGN  T25

SUM159PT    SUM159PT 人乳腺癌細(xì)胞   T25

MMQ 大鼠垂體瘤細(xì)胞；MMQ T25

IOSE-80 人正常卵巢上皮細(xì)胞 IOSE-80  T25

OVCA-429    人卵巢癌細(xì)胞OVCA-429    T25

KNS-89  KNS-89人腦膠質(zhì)細(xì)胞瘤細(xì)胞    T25