ELISA試劑盒酶標(biāo)板關(guān)鍵有哪些

我們根據(jù)ELISA試劑盒不同的分類標(biāo)準(zhǔn)，酶標(biāo)板有著不同的分類。

一、根據(jù)孔數(shù)，ELISA試劑盒酶標(biāo)板關(guān)鍵分類酶標(biāo)板關(guān)鍵分類可分為96孔、48孔等，由于酶標(biāo)板首要是協(xié)作酶標(biāo)儀用，現(xiàn)在市面上的酶標(biāo)儀有48孔和96孔，但酶標(biāo)板常用的是96孔。

二、根據(jù)其底部的不同，又分為平底的，U型底、V型底等。平底的折射率低，適于在酶標(biāo)儀檢測；U型底的酶標(biāo)板折射率較高，便當(dāng)加樣、吸樣、混勻等操作，可以不用放在酶標(biāo)儀上，直接通過目測調(diào)查色彩改動狀況，然后斷定有無相應(yīng)的免疫反應(yīng)。V底的酶標(biāo)板可以的汲取樣品。

三、根據(jù)酶標(biāo)板與蛋白和其它分子結(jié)合才干的不同，又分為高結(jié)合力、中結(jié)合力和氨基化等。

1） 高結(jié)合力

此種酶標(biāo)板，表面經(jīng)處理后，其蛋白結(jié)合才干大大增強，可達300~400ng IgG/cm2，首要結(jié)合的蛋白分子量＞10kD。運用該類酶標(biāo)板可進步敏感性，并可相對減少包被蛋白的濃度和用量，不足之處為較易發(fā)生非特異性反應(yīng)?？乖蚩贵w包被后，以非離子去污劑無法有效地封閉未結(jié)合蛋白的部位，需運用蛋白作為封閉劑。

（2) 中結(jié)合力

此類酶標(biāo)板經(jīng)表面疏水鍵與蛋白結(jié)合，適宜作為分子量＞20kD的大分子蛋白的固相載體，其蛋白結(jié)合才干為200~300ng IgG/cm2。由于該類酶標(biāo)板所具有的僅與大分子結(jié)合的特性，適用于作為未純化抗體或抗原的固相載體，可下降潛在的非特異性穿插反應(yīng)。該類板可以慵懶蛋白或非離子去污劑作為封閉液。

（3)氨基化

ELISA試劑盒這種酶標(biāo)板經(jīng)表面改性處理后具有帶正電荷的氨基，其疏水鍵由親水鍵代替。該類酶標(biāo)板適宜作為小分子蛋白的固相載體。運用適宜的緩沖液和pH值，其表面可通過離子鍵與帶負電荷的小分子結(jié)合。由于其表面的親水特性和可通過其它交聯(lián)劑共價結(jié)合的才干，可用于固定溶于Triton-100、Tween 20等去污劑的蛋白分子。該類板的缺陷為由于下降了疏水性，一部分蛋白分子無法結(jié)合；此外，其表面需有效地封閉。由于親水和共價的表面特性，運用的封閉液有必要可以與非反應(yīng)性氨基基團和所挑選的交聯(lián)劑中任何功用基團發(fā)生作用。

四、根據(jù)色彩可分為透明、黑色、白色。

透明的是常用的，用于一般的酶聯(lián)免疫實驗。相對于透明的的酶標(biāo)板，還有用于發(fā)光檢測用的不透明的酶標(biāo)板，一般有黑色和白色兩種。黑色的酶標(biāo)板本身會有光吸收，所以它的信號相對于白色酶標(biāo)板要低許多，因而一般用于檢測較強的光，如熒光檢測。而白色的酶標(biāo)板就用于較弱的光檢測，常用于一般的化學(xué)發(fā)光。其他黑色的酶標(biāo)板還可以消弱非特異反應(yīng)帶來的問題。一同需求留意的是，用一般的酶標(biāo)板不可以進行發(fā)光檢測，由于一般從化學(xué)發(fā)光反應(yīng)中發(fā)射出的光是各向同性，如果用透明的酶標(biāo)板，光不只會從筆直方向發(fā)散，還會從水平方向發(fā)散，使得光極易通過各個孔之間的空地和孔壁，然后導(dǎo)致各孔的光吸收值遭到相鄰孔發(fā)射光的影響。