反相色譜(Reversed-Phase Chromatography,RPC)是使用最多的分離模式之一:以非極性反相介質(zhì)為固定相,極性有機(jī)溶劑的水溶液為流動相,根據(jù)溶質(zhì)之間疏水性差異進(jìn)行分離。多肽和蛋白等生物大分子,尺寸通常遠(yuǎn)大于固定相表面官能團(tuán),其表面局部區(qū)域與固定相發(fā)生作用,分離以吸附機(jī)理為主:初始條件下,流動相中有機(jī)成分濃度較低,多肽和蛋白等生物大分子與固定相疏水作用較強(qiáng),幾乎被固定相吸附;當(dāng)流動相中有機(jī)成分到達(dá)特定濃度,大分子從固定相上洗脫下來,不再與固定相發(fā)生作用。因此,流動相有機(jī)成分極微小變化,就可以明顯影響多肽和蛋白的反相保留行為。
抗體/蛋白類藥物完整和還原態(tài)分析,是表征其療效與穩(wěn)定性的關(guān)鍵質(zhì)量屬性之一,目前通常使用反相色譜分離模式;抗體偶聯(lián)藥物(ADC)DAR值分析,基于不同載荷疏水性差異,同樣可以使用反相色譜來進(jìn)行分離。
納譜分析潛心研發(fā)出BioCore RP-1000反相色譜柱,可以實(shí)現(xiàn)IgG抗體片段和抗體偶聯(lián)藥物不同DAR值組分的良好分離。 BioCore RP-1000色譜柱是一款以的單分散聚合物微球?yàn)榛|(zhì),經(jīng)優(yōu)化的裝柱工藝而成的色譜柱,適用于反相分離模式下,完整蛋白分子量測定、抗體片段和抗體偶聯(lián)藥物DAR值分析等。
特性:
單分散聚合物微球,柱效高;
分離選擇好,非特異性吸附低;
柱流失低,質(zhì)譜兼容性良好;
良好柱間一致性。
參數(shù):
產(chǎn)品名稱 | BioCore RP-1000 |
功能基團(tuán) | 苯基 |
基質(zhì) | 單分散PS/DVB微球 |
粒徑 | 5 µm |
孔徑 | 1000 ? |
常用柱規(guī)格 | 2.1x50 mm, 2.1x100 mm 3.0x50 mm, 3.0x100 mm 4.6x50 mm, 4.6x100 mm |
耐壓上限 | 4500 psi |
耐溫上限 | 100 °C |
pH范圍 | 2 - 12 |
應(yīng)用領(lǐng)域 | 抗體/蛋白分子量鑒定/片段分離 |
應(yīng)用案例:
產(chǎn)品名稱 | 粒徑(µm) | 柱長(mm) | 內(nèi)徑 (mm) | ||
4.6 | 3.0 | 2.1 | |||
BioCore RP-1000 | 5 | 100 | B811-050100-04610S | B811-050100-03010S | B811-050100-02110S |
50 | B811-050100-04605S | B811-050100-03005S | B811-050100-02105S |
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