ExoDisc™純化盤是從細胞培養(yǎng)上清液(CCS)、尿液樣本和少量血漿樣本中快速、免標記、高效地分離完整細胞外囊泡(EVs)的理想選擇。具有高產(chǎn)率和高純度的富集EVs可為下游分析做準備,例如NTA(納米顆粒跟蹤分析技術(shù))、SEM、TEM、蛋白質(zhì)印跡、ELISA、PCR或測序,從而將精準科學用于精準醫(yī)學。
使用尿液樣本,尿液來源的EVs是用于精準醫(yī)學疾病狀態(tài)實時分子表征的一個可靠來源。
ExoDisc(覆蓋CCS,尿液,血漿的所有應用)
簡單的3步驟[時間:10~40min]
應用
與其他EVs分離方法的對比
將ExoDisc™的性能與兩種常用的EV分離方法進行了比較:超離心(UC)和Exo-spin™。從1ml前列腺癌細胞培養(yǎng)上清液開始,使用三種不同的方案分離EVs,并通過納米顆粒跟蹤分析技術(shù)(NTA)、酶聯(lián)免疫吸附測定(ELISA)和聚合酶鏈式反應(PCR)表征EVs。ExoDisc™與超離心法相比:EVs回收率 > 95%,mRNA的濃度> 100倍。
完整的EVs
優(yōu)勢
類別 | ExoDisc | UC | Exo-spin |
EVs 分離時間 (h) | 0.5 | 6 | 4 |
離心力 (g) | 500 | 150,000 | 16,000 |
NTA (109 顆粒/mL) | 25.2 ± 0.2 | 6.5 ± 0.1 | 9.1 ± 0.8 |
純度 (107顆粒/μg 蛋白質(zhì)) | 50.5 ± 16.3 | 2.0 ±0.1 | 0.4 ± 0.9 |
三明治 ELISA CD9/CD81 EVs 濃度 (108 CD9-EVs/mL) | 120 ±0.1 | 9.1 ± 2.5 | 23.5 ±1.9 |
總RNA (ng/μL) | 46.3 ± 7.3 | 2.8 ± 2.3 | 20.7 ±4.1 |
mRNA 表達 (與UC相比的折疊變化) |
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-GAPDH | 168.9±3.6x | 1x | 42.2 ± 0.8x |
-CD9 | 157.6±16.2x | 1x | 45.3 ± 3.7x |
-PSA | 111.4±6.1x | 1x | 27.9±0.5x |
-PSMA | 207.9 ±10.8x | 1x | 45.3 ± 2.8x |
與其他EVs分離方法的對比
將ExoDisc™的性能與兩種常用的EV分離方法進行了比較:超離心(UC)和Exo-spin™。將從用AR-FL和AR-V7轉(zhuǎn)染的人胰腺癌細胞
(ATCC CRL-1435)中分離的EVs摻入4ml尿液中。通過納米顆粒追蹤分析(NTA)、酶聯(lián)免疫吸附測定(ELISA)和聚合酶鏈式反應(PCR)對分離的EVs進行表征。ExoDisc™與超離心法相比:EVs回收率 > 95%,3-17倍高的產(chǎn)量,>5倍高的純度。
與超離心法對比
應用:在活體小鼠異種移植模型中監(jiān)測腫瘤生長
應用:癌癥患者血漿EVs的蛋白分析
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