上海曼賢實(shí)驗(yàn)儀器提供的華西/禾汽點(diǎn)樣毛細(xì)管點(diǎn)樣毛細(xì)管精心設(shè)計(jì)成不同大小，管口平面特殊切成，使得樣品容易、有效地點(diǎn)到TLC板上而不損傷TLC板。管子結(jié)實(shí)，牢固，不易折斷。

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點(diǎn)樣毛細(xì)管的使用

不同溶劑對(duì)樣品的洗脫能力不同，因此在點(diǎn)樣的同時(shí)，樣品在原點(diǎn)開始呈環(huán)形展開，如果樣品在溶劑中的溶解度很大，原點(diǎn)將變成空心環(huán)，Kaiser稱這種現(xiàn)象為“點(diǎn)樣環(huán)形色譜效應(yīng)”。這種效應(yīng)對(duì)隨后的線形展開造成不良影響，因此配制樣品溶液時(shí)應(yīng)選用對(duì)組分溶解度相對(duì)較小的溶劑；溶劑的粘度不宜過高，以便于點(diǎn)樣，溶劑的沸點(diǎn)要適中，沸點(diǎn)過低由于揮發(fā)會(huì)改變樣品溶液濃度導(dǎo)致較大誤差，沸點(diǎn)過高，樣品溶液的溶劑會(huì)在原點(diǎn)殘留，導(dǎo)致改變展開劑的選擇性，特別是樣品溶液的溶劑與展開劑的極性相差較大時(shí)更為明顯，zui常用的溶劑為甲醇及乙醇，有時(shí)也用丙酮。點(diǎn)樣后必須將溶劑全部除去后再進(jìn)行展開，但要避免高溫加熱，以免改變待測(cè)成分的性質(zhì)。

    點(diǎn)樣方式、點(diǎn)樣量及點(diǎn)樣設(shè)備的選擇決定于分析的目的、樣品溶液的濃度及被測(cè)物質(zhì)的檢出靈敏度。
    點(diǎn)樣體積經(jīng)典薄層一般為1-5μl，高效薄層為100-500nl，樣品溶液濃度一般在0.01%-1.00%范圍內(nèi)，點(diǎn)樣過多會(huì)造成原點(diǎn)“超載”，展開劑產(chǎn)生“繞行”現(xiàn)象使斑點(diǎn)拖尾或重疊，使掃描峰形不對(duì)稱或不能基線分離，并由于超載得到非線性的校正曲線，嚴(yán)重影響定量結(jié)果，降低準(zhǔn)確度。
    經(jīng)典薄層的原點(diǎn)直徑zui大不得超過5mm，一般3mm較為合適，高效薄層原點(diǎn)直徑約為1-2mm，盡可能避免多次點(diǎn)樣，原點(diǎn)直徑過大會(huì)降低分辨率及分離度。
    經(jīng)典薄層起始線距底邊約1.5cm，高效薄層為1cm，展距前者為10-15cm，后者為5-7cm，對(duì)于難分離的化合物用多元展開劑展開時(shí)，注意原點(diǎn)與展開劑的距離每次要保持*，否則由于色譜分離zui初行為的差異而導(dǎo)致分離失敗。
    點(diǎn)與點(diǎn)的間距經(jīng)典薄層為1-2cm，高效薄層為0.5cm，用具自動(dòng)換行功能的薄層掃描儀時(shí)，斑點(diǎn)之間的距離必須十分精確，才能正確地掃描每行的色斑，得到好的測(cè)定結(jié)果，圖7-3-1為一般的點(diǎn)樣圖解。

    在點(diǎn)樣前，應(yīng)將薄層板在日光及紫外光下檢查板面有無損壞或污染，選擇合格的薄層板后決定用點(diǎn)狀點(diǎn)樣還是用帶狀點(diǎn)樣。為此，瑞士CAMAG公司生產(chǎn)了系列點(diǎn)樣設(shè)備以供選用，這些設(shè)備只適用于硬板。下面是常用的點(diǎn)樣方式及設(shè)備。
（一）點(diǎn)狀點(diǎn)樣
    如果僅僅為了定性，用內(nèi)徑約0.5mm管口平整的毛細(xì)管或微量注射器將樣品溶液點(diǎn)在距薄層底邊約2cm處，點(diǎn)樣直徑不超過5mm，點(diǎn)間距約為1-1.5cm即可。
    為進(jìn)行定量，借毛細(xì)作用吸樣的定容管有兩種，一是容積為0.5、1、2、3、4及5μl的定量毛細(xì)管（Microcaps），另一種是100及200nl的鉑銥合金定量毛細(xì)管（Nanopipette）；注射器式的可變體積的點(diǎn)樣器有50-230nl的毫微點(diǎn)樣器（Nano-Applicator）及0.5-2.3μl的微量點(diǎn)樣器（Micro-Applicator），用于需要調(diào)節(jié)體積及沒有毛細(xì)作用的鍵合相薄層的點(diǎn)樣。
    毛細(xì)管式的微量點(diǎn)樣器裝在手動(dòng)的Nanomat型點(diǎn)樣裝置的磁性點(diǎn)樣頭上，點(diǎn)樣頭裝在彈簧上。按下此點(diǎn)樣頭，毛細(xì)管借恒定的壓力接觸薄層表面。點(diǎn)間距離由帶準(zhǔn)確的#44 間隔的E字形缺刻裝置控制，CAMAG Nanomat Ⅲ型手動(dòng)點(diǎn)樣器，適用于普通或高效薄層板，點(diǎn)樣體積精確，樣品原點(diǎn)小，原點(diǎn)間隔定位準(zhǔn)確；注射器式的毫微點(diǎn)樣器及微量點(diǎn)樣器由測(cè)微尺控制，也可與Nanomat型點(diǎn)樣裝置配合，以使點(diǎn)樣位置精確。
    電動(dòng)的Nanomat Ⅲ型點(diǎn)樣裝置*適用于上述各種點(diǎn)樣器的配套使用，并且還可以自動(dòng)控制點(diǎn)樣次數(shù)，點(diǎn)樣器在薄居上的停留時(shí)間，以及點(diǎn)樣器接觸薄層的速度。還可避免手持毛細(xì)管點(diǎn)樣時(shí)的用力不勻，由于靠機(jī)械控制接觸板面，壓力恒定。此外，還有可以用于環(huán)形展開及向心展開的薄層點(diǎn)樣裝置。
（二）帶狀點(diǎn)樣
    當(dāng)樣品溶液體積大、濃度稀時(shí)，采用CAMAG Linoamt Ⅳ型自動(dòng)點(diǎn)樣設(shè)備進(jìn)行帶狀點(diǎn)樣。定量分析的點(diǎn)樣范圍為1-99μl，制備型分離點(diǎn)樣范圍為5-490μl，作定量標(biāo)準(zhǔn)曲線時(shí)，可由同一標(biāo)準(zhǔn)溶液，自動(dòng)點(diǎn)上不同體積的標(biāo)準(zhǔn)液，故快速簡(jiǎn)便，利用內(nèi)裝的微處理器編序操作，簡(jiǎn)單易行。使用時(shí)樣品溶液吸在微量注射器中，點(diǎn)樣器不接觸薄層，而是用氮?dú)鈱⒆⑸淦麽樇獾娜芤捍德湓诒由?，薄層板在針頭下定速移動(dòng)點(diǎn)成0-199mm的窄帶。帶狀點(diǎn)樣展開后的斑點(diǎn)不僅分辨率明顯高于點(diǎn)狀點(diǎn)樣，而且精密準(zhǔn)確，為定量分析提供*條件。
（三）自動(dòng)點(diǎn)樣
    Automatic TLC Sampler Ⅲ型（ATS Ⅲ）全自動(dòng)點(diǎn)樣裝置結(jié)合了現(xiàn)代的電子及機(jī)械技術(shù)，能進(jìn)行點(diǎn)狀或帶狀點(diǎn)樣，采用計(jì)算機(jī)編程控制，靈活多用，點(diǎn)樣量為10nl-50μl，可隨意設(shè)定點(diǎn)樣規(guī)范，可應(yīng)用于單向、雙向、環(huán)形或向心色譜展開，高度自動(dòng)化的點(diǎn)樣使定量分析結(jié)果準(zhǔn)確。點(diǎn)樣參數(shù)可與Scanner Ⅱ掃描儀的CATS掃描分析軟件連用，令定量分析工作達(dá)到高度自動(dòng)化。
（四）接觸點(diǎn)樣
    當(dāng)樣品溶液粘度較大或點(diǎn)樣體積要超過100μl時(shí)，用毛細(xì)管點(diǎn)樣就有困難，F(xiàn)enimore設(shè)計(jì)的接觸點(diǎn)樣法適用于這類樣品的點(diǎn)樣，美國制造的Clarke Contact Spotter就是這種接觸點(diǎn)樣器，見圖7-3-2。在帶有抽氣孔的凹形塊的上方覆蓋一片涂有疏水性物質(zhì)的聚氟化物薄膜（a），當(dāng)減壓抽氣時(shí)薄膜凹陷（b），此時(shí)將樣品溶液點(diǎn)在凹槽處（c），然后用氮?dú)獯等ゴ蟛糠秩軇╠），再將濃縮后的樣品液滴與高效薄層板的吸附劑層接觸（e），此時(shí)樣品就定量地轉(zhuǎn)移到薄層上。

1988年Kaiser對(duì)以上各種點(diǎn)樣方式進(jìn)行了比較，總結(jié)其優(yōu)缺點(diǎn)見表7-3-1、圖7-3-3。

表7-3-1 各種點(diǎn)樣方式的比較北京威鋒技術(shù)開發(fā)公司

圖7-3-3中A-F為zui常用的毛細(xì)管或注射器點(diǎn)樣：A—一次性數(shù)毫米長的薄壁玻管；B—長5-60mm，內(nèi)徑為0.2-0.05mm的熔融石英管，用機(jī)械手操作；C—封在玻璃管中的鉑銥合金管（100nl,200nl），可精確點(diǎn)樣，生物樣品點(diǎn)樣后可用火焰清潔，見圖7-3-4；E—微量注射器，機(jī)械控制，接觸板面點(diǎn)樣；F—同E，用步進(jìn)馬達(dá)控制操作；G—同E，樣品溶液用氣體噴到薄層板上；H—同E，*用計(jì)算機(jī)控制點(diǎn)樣；I、K、L—借泵系統(tǒng)點(diǎn)樣，用于高壓平面液體色譜（HPPLC）；M—為Fenimore的固態(tài)樣品環(huán)形轉(zhuǎn)移器。

    用管狀點(diǎn)樣器上樣的誤差來源是由于點(diǎn)樣時(shí)薄層表面的損傷，溶液“爬壁”效應(yīng)使外壁樣品的沉積、樣品的記憶效應(yīng)以及管中的微小氣泡等，見圖7-3-5。
    點(diǎn)樣誤差的大小與樣品的溶解度，溶液的表面張力，溶劑的粘度、揮發(fā)性和極性、點(diǎn)樣所耗費(fèi)的時(shí)間、薄層板的質(zhì)量（粒度、均勻度、薄層厚度、粘合劑的性質(zhì)）等有關(guān)。
（五）特殊的點(diǎn)樣技術(shù)
    在進(jìn)行植物成分薄層分離之前，提取是首要的步驟，常用適當(dāng)溶劑進(jìn)行待測(cè)物質(zhì)的提取，但此法操作麻煩、樣品需要量較大，濃縮提取液時(shí)對(duì)熱不穩(wěn)定的成分易破壞，因此人們研究了樣品不經(jīng)提取而直接點(diǎn)樣的方法。
1.熱微量抽出法
    半個(gè)世紀(jì)前，人們將一些藥物進(jìn)行微量升華，對(duì)升華物進(jìn)行晶型、熔點(diǎn)以及理化性質(zhì)等鑒定。在zui簡(jiǎn)單的情況下，只需將幾毫克生藥粉末放在微量載玻片上加熱，升華物被收集到距離放樣品載玻片1mm的另一塊載玻片上。1968年Stahl將熱微量分離轉(zhuǎn)移技術(shù)與薄層色譜法連用，稱為“熱微量抽出法”此法的優(yōu)點(diǎn)是大大縮短了提取生藥中揮發(fā)性成分前處理的時(shí)間，簡(jiǎn)化了提取方法，減少了樣品用量，缺點(diǎn)是不宜用于非揮發(fā)性成分。
    將植物粉末樣品放在一端拉細(xì)的玻璃管中，并同時(shí)放入含有一定水分的合適添加劑，使加熱過程中保持連續(xù)的水蒸氣流（在TAS法中除用含水的分子篩作中性發(fā)氣劑外，還可用酸性發(fā)氣劑，如丙二酸，在180℃時(shí)產(chǎn)生二氧化碳和乙酸，能使樣品中的堿性揮發(fā)性成分以鹽的形式保留而不逸出，而酸性揮發(fā)性成分隨酸性氣體轉(zhuǎn)移到薄層上；反之亦可用堿性發(fā)氣劑，如含氨的氯化鈣，使樣品中的堿性成分隨氨氣轉(zhuǎn)移到薄層上），管的一端用硅橡膠薄膜嚴(yán)密封閉，并放置在一定溫度的TAS爐上，裝置見圖7-3-6。