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大腸桿菌和大腸菌群快速檢驗(yàn)測(cè)試片

一、操作方法

二、判讀手冊(cè)

Petrifilm Coliform^TM Coliform測(cè)試片含有VRB培養(yǎng)劑 Violet Red Bile，一種冷水可溶性的凝膠劑和四唑翁tetrazollium指示劑，可增強(qiáng)菌落計(jì)數(shù)效果。絕大多數(shù)E .coli（約占97%）能產(chǎn)生-葡萄糖甘酸酶與培養(yǎng)基中的指示劑反應(yīng)，產(chǎn)生藍(lán)色沉淀環(huán)繞在大腸桿菌菌落周圍，表面覆蓋的膠膜，可留住發(fā)酵乳糖的大腸菌群產(chǎn)生的氣體，約有95%的大腸桿菌產(chǎn)生，形成藍(lán)色或深藍(lán)上菌落并有氣泡相連接，氣泡大小約為1個(gè)菌落直徑。

AOAC和FDA細(xì)菌學(xué)分析手冊(cè)（RAM）規(guī)定大腸菌群為革蘭氏陰性桿菌，發(fā)酵乳糖產(chǎn)酸產(chǎn)氣。大腸菌群菌落在Petrifilm EC測(cè)試片上生長(zhǎng)產(chǎn)酸，PH指示劑使培養(yǎng)基顏色變深，在紅色菌落周圍有氣泡者，為大腸菌群細(xì)菌。大腸桿菌鑒定，在不同可以有變更（見培養(yǎng)時(shí)間和溫度部分指示）。

[貯藏]

1、未開封時(shí)，冷藏于≤8℃（≤46℉），并在保存期內(nèi)用完，高溫度時(shí)，凝固水可以排除，包裝物于室溫啟開。

2、已開封的，將封口以膠帶封緊。

3、保存再封的袋于≤25℃（≤77℉）和溫度<50％，不要冷藏已開啟的包裝袋，并于一個(gè)月內(nèi)使用完。

[樣品制備]

4、制備1：10和更大稀釋的食物樣品稀釋液，稱取或吸取食物樣品，置入適宜的無菌容器內(nèi)，如均質(zhì)袋、稀釋瓶、WhirlPak bag或者其他滅菌容器內(nèi).

5、加入適量的無菌稀釋液,包括Buffered peptone BufferIDF phopsphate buffer ,用0.0425g/L的KH2PO4調(diào)PH7.2 、0.1%的蛋白膠水ISO方法6887 、緩沖蛋白膠水ISO方法6579 、鹽溶液0.85-0.90%、bisulfite-free letheen broth或蒸餾水.

但不可用含有枸櫞酸鹽、bisulfite or thiosulfate的緩沖液. 因?yàn)樗芤种咕L(zhǎng)。

6、攪拌或均質(zhì)樣品
酸性樣品的稀釋液用INNaoH調(diào)PH6.5－7.5，對(duì)堿性樣品的稀釋液用IN HCL調(diào)PH6.5－7.