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一、*微生物檢測(cè)板產(chǎn)品介紹
1、原理及適用范圍
*(Staphylococcus aureus簡(jiǎn)稱金葡菌)是人類常見(jiàn)的致病菌之一,其侵襲力很強(qiáng),能產(chǎn)生多種致病物質(zhì)如:腸毒素、凝固酶等;可引起化膿性炎癥、毒素性疾病及葡萄球菌性腸炎。金葡菌所引起的中毒事件已成為世界性的公共衛(wèi)生問(wèn)題,我國(guó)每年由金葡菌引起的食物中毒事件屢有報(bào)道。*檢測(cè)板含有選擇性培養(yǎng)基和專一性的酶顯色劑,運(yùn)用微生物測(cè)試片專有技術(shù),做成一次性快速檢驗(yàn)產(chǎn)品,一步培養(yǎng)15-24 h就可確定出病原菌的存在,大大地簡(jiǎn)化了檢測(cè)程序。本品對(duì)于提高衛(wèi)生行政監(jiān)督部門對(duì)食源性疾病的監(jiān)測(cè)能力和預(yù)警能力,以及應(yīng)對(duì)細(xì)菌性食物中毒突發(fā)公共衛(wèi)生事件中的反應(yīng)能力具有重要的作用,同時(shí)也可在食品生產(chǎn)企業(yè)使用。執(zhí)行標(biāo)準(zhǔn):中華人民共和國(guó)標(biāo)準(zhǔn)《食品安全標(biāo)準(zhǔn) 食品微生物學(xué)檢驗(yàn) *檢驗(yàn)》(GB 4789.10)。
2、操作方法
2.1 樣品處理:取樣品 25 mL(g)放入含有225 mL滅菌生理鹽水的取樣罐或均質(zhì)袋內(nèi),制成1:10的樣品勻液。根據(jù)樣品污染程度及檢驗(yàn)需要,可進(jìn)一步制成10倍遞增的樣品稀釋液,選擇2~3 個(gè)適宜稀釋度的樣品勻液(液體樣品可包括原液)來(lái)進(jìn)行接種。
2.2 接種:將*檢測(cè)板上層膜不干膠標(biāo)簽部分揭開(kāi),用無(wú)菌吸管吸取1 mL樣品勻液均勻地滴加到紙片上,迅速貼好上層膜并水平晃動(dòng)檢測(cè)板,讓樣品勻液均勻吸附在濾紙上,靜置10 s左右,待樣品勻液被吸附在濾紙上。每個(gè)梯度接種兩片作為重復(fù)。
2.3 培 養(yǎng):將檢測(cè)板疊在一起,倒置于恒溫培養(yǎng)箱內(nèi),36℃±1℃,培養(yǎng)15~24 h。
3、*微生物檢測(cè)板結(jié)果判讀
紫紅色的菌落為*;呈藍(lán)色的菌落為其他雜菌。選擇菌落數(shù)適中(20~200CFU)的檢測(cè)板進(jìn)行計(jì)數(shù),乘以稀釋倍數(shù)后即為每毫升(克)樣品中所含的*數(shù)目。
4、計(jì)數(shù)原則及報(bào)告方式
4.1 若只有一個(gè)稀釋度檢測(cè)板上的菌點(diǎn)數(shù)目在適宜計(jì)數(shù)范圍內(nèi),計(jì)算兩個(gè)檢測(cè)板菌落數(shù)的平均值,再將平均值乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù),作為每毫升(克)樣品中所含的*結(jié)果。
4.2 若有兩個(gè)連續(xù)稀釋度的檢測(cè)板菌落數(shù)目在適宜計(jì)數(shù)范圍內(nèi)時(shí),按式(1)計(jì)算:
∑C
N= ———————— •••••••••••••••••••(1)
(n1+0.1n2)d
式中:
N——樣品中*數(shù)目;
∑C——檢測(cè)板上(含適宜范圍菌落數(shù)的檢測(cè)板)菌落數(shù)之和;
n1——*稀釋度(低稀釋倍數(shù))檢測(cè)板數(shù);
n2——第二稀釋度(高稀釋倍數(shù))檢測(cè)板數(shù);
d——稀釋因子(*稀釋度)。
4.3 若所有的稀釋度菌落數(shù)目均大于200 CFU,則對(duì)稀釋度較高的測(cè)試片進(jìn)行計(jì)數(shù),其他檢測(cè)板可記錄為多不可計(jì),結(jié)果按平均菌落數(shù)乘以較高稀釋倍數(shù)計(jì)算。
4.4 若所有的稀釋度菌落數(shù)目均小于20 CFU,則按稀釋度*低的平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)計(jì)算。
4.5 若所有的稀釋度均無(wú)菌落生長(zhǎng),則以小于1乘以*低稀釋倍數(shù)計(jì)算。
4.6 若所有稀釋度的平均菌落數(shù)目均不在20-200 CFU之間,其中一部分小于20 CFU或者大于300 CFU,則以接近20 CFU或200 CFU的平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)計(jì)算。
5、結(jié)果報(bào)告
固體樣品以CFU/g為單位報(bào)告,液體樣品以CFU/mL為單位報(bào)告。
6、附加說(shuō)明
注意使用過(guò)的檢測(cè)板上帶有活菌,需及時(shí)按照生物安全廢棄物處理原則進(jìn)行處理。