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一、大腸菌群微生物檢測(cè)板產(chǎn)品介紹
1、原理及適用范圍
大腸菌群是評(píng)價(jià)食品衛(wèi)生質(zhì)量的重要指標(biāo)之一，目前已被廣泛應(yīng)用于食品衛(wèi)生檢驗(yàn)工作中。大腸菌群多存在于溫血?jiǎng)游锛S便、人類經(jīng)?；顒?dòng)的場(chǎng)所以及有糞便污染的地方，大腸菌群數(shù)的高低，表明了食品及食品生產(chǎn)過(guò)程中受污染的程度。大腸菌群檢測(cè)板含有培養(yǎng)基、大腸菌群特異性酶的顯色指示劑和高分子吸水凝膠，運(yùn)用微生物檢測(cè)板專有技術(shù)，做成一次性快速檢驗(yàn)產(chǎn)品。本產(chǎn)品適合于食品及原料中大腸菌群的計(jì)數(shù)，如消毒牛乳、冷飲和調(diào)味品等樣品的檢測(cè)，也可用于表面的衛(wèi)生檢測(cè)。
執(zhí)行標(biāo)準(zhǔn)：中華人民共和國(guó)標(biāo)準(zhǔn)《食品安全標(biāo)準(zhǔn) 食品微生物學(xué)檢驗(yàn) 大腸菌群計(jì)數(shù)》（GB 4789.3）；中華人民共和國(guó)出入境檢驗(yàn)檢疫行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)《食品中大腸菌群和大腸桿菌快速計(jì)數(shù)法——PetrifilmTM 檢測(cè)板法》（SN/T 1896）。
2、大腸菌群微生物檢測(cè)板操作方法
2.1 樣品處理：取樣品 25 mL（g）放入含有225 mL滅菌磷酸緩沖液（或生理鹽水）的取樣罐或均質(zhì)袋內(nèi)，制成1:10的樣品勻液，根據(jù)樣品污染程度及檢驗(yàn)需要，可進(jìn)一步制成10倍遞增的樣品稀釋液。
2.2 接種：一般食品2～3個(gè)適宜的稀釋度進(jìn)行檢測(cè)，含菌量少的液體樣品（如飲用純水和礦泉水等）可直接吸取原液進(jìn)行檢測(cè)。將大腸菌群檢測(cè)板置于平坦實(shí)驗(yàn)臺(tái)面，揭開上層膜，用無(wú)菌吸管吸取1 mL樣品勻液滴加到檢測(cè)板內(nèi)，迅速貼好上層膜并水平晃動(dòng)檢測(cè)板，讓樣品勻液均勻吸附在濾紙上，靜置10 s左右，待樣品勻液被吸附在濾紙上。每個(gè)稀釋度接種兩片。做好空白陰性對(duì)照。
2.3 培養(yǎng)： 將檢測(cè)板疊在一起，倒置放于培養(yǎng)箱內(nèi)。培養(yǎng)溫度為36℃±1℃，培養(yǎng)15～24h。
3、結(jié)果判讀
培養(yǎng)后紙片上的藍(lán)色菌落為大腸菌群菌落，菌落數(shù)適中（15～150CFU）的紙片進(jìn)行計(jì)數(shù)。
兩個(gè)檢測(cè)板的平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)即為每克（或每毫升）樣品中的大腸菌群菌落行程單位數(shù)。
如果所有的稀釋度檢測(cè)板上的菌落數(shù)都小于15CFU，則計(jì)數(shù)稀釋度較低的檢測(cè)板上的平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)報(bào)告；
如果所有的稀釋度的檢測(cè)板上均無(wú)菌落生長(zhǎng)，則以小于1乘以較低稀釋倍數(shù)報(bào)告；
如果較高稀釋倍數(shù)大于150CFU的檢測(cè)板時(shí)，可計(jì)數(shù)一半或者1/4，然后再乘以2或者4，即為檢測(cè)板上估算的菌落數(shù)。
報(bào)告單位以CFU/g（或CFU/mL）表示。
4、附加說(shuō)明
4.1大腸菌群檢測(cè)板不但可以大大縮短檢測(cè)時(shí)間，而且檢測(cè)結(jié)果與傳統(tǒng)方法很接近，符合率可達(dá)90％左右。
4.2 如果樣品的酸堿度pH 7.0以下時(shí)，應(yīng)先用滅過(guò)菌的堿性溶液（如1 mol/L NaOH）調(diào)節(jié)到pH6.5～7.5。
4.3 注意使用過(guò)的檢測(cè)板上帶有活菌，需及時(shí)按照生物安全廢棄物處理原則進(jìn)行處理。
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