NCYC 234 [IPAZSC 48]細(xì)胞潛伏期(latent phase):細(xì)胞接種后,先經(jīng)過一個在培養(yǎng)液中呈懸浮狀態(tài)的懸浮期.此時,細(xì)胞質(zhì)回縮,胞體呈圓球形.然后細(xì)胞貼附于載體表面,稱貼壁,懸浮期結(jié)束. 細(xì)胞貼壁速度與細(xì)胞種類,培養(yǎng)基成分,載體的理化性質(zhì)等密切相關(guān)。一般情況下,原代培養(yǎng)細(xì)胞貼壁速度慢,可達(dá)0-24 小時或更多,而傳代細(xì)胞系貼壁速度快,通常0-30 分鐘即可貼壁。細(xì)胞貼壁后還需經(jīng)過一個潛伏階段,才進(jìn)入生長和增殖期.原代培養(yǎng)細(xì)胞潛伏期,約24-96 小時或更長,連續(xù)細(xì)胞系和腫瘤細(xì)胞潛伏期短,僅需6-24 小時。
細(xì)胞指數(shù)增生期(logarithmic growth phase) 這是細(xì)胞增殖zui旺盛的階段,分裂相細(xì)胞增多。指數(shù)增生期細(xì)胞分裂相數(shù)量可作為判定細(xì)胞生長是否旺盛的一個重要標(biāo)志。通常以細(xì)胞分裂相指數(shù)(Mitotic index,MI)表示,即細(xì)胞群中每000 個細(xì)胞中的分裂相數(shù)。一般細(xì)胞的分裂指數(shù)介于0.%-0.5%,原 代細(xì)胞分裂指數(shù)較低,而連續(xù)細(xì)胞和腫瘤細(xì)胞分裂相指數(shù)可高達(dá)3%-5%。NCYC 234 [IPAZSC 48]指數(shù)增生期的細(xì)胞是細(xì)胞活力時期,是進(jìn)行各種實(shí)驗(yàn)*時期,也是凍存細(xì)胞的時機(jī)。在接種細(xì)胞數(shù)量適宜情況下,指數(shù)增生期持續(xù)3-5 天后,隨著細(xì)胞數(shù)量不斷增多、生長空間減少,zui后細(xì)胞相互接觸匯合成片。
正常細(xì)胞相互接觸后能抑制細(xì)胞運(yùn)動,這種現(xiàn)象稱接觸抑制現(xiàn)象(contact inhibition)。而惡性腫瘤細(xì)胞無接觸抑制現(xiàn)象,能繼續(xù)移動和增殖,導(dǎo)致細(xì)胞向三維空間擴(kuò)展,使細(xì)胞發(fā)生堆積(piled up)。細(xì)胞接觸匯合成片后,雖然發(fā)生接觸抑制,但只要營養(yǎng)充分,細(xì)胞仍能進(jìn)行增殖分裂,因此細(xì)胞數(shù)仍然在增多。但是,當(dāng)細(xì)胞密度進(jìn)一步增大,培養(yǎng)液中營養(yǎng)成分減少,代謝產(chǎn)物增多時,細(xì)胞因營養(yǎng)枯竭和代謝產(chǎn)物的影響,導(dǎo)致細(xì)胞分裂停止,這種現(xiàn)象稱密度抑制現(xiàn)象(Density Inhibition)。
培養(yǎng)細(xì)胞注意事項(xiàng):
實(shí)驗(yàn)進(jìn)行前,無菌室及無菌操作臺(laminarflow)以紫外燈照射30-60分鐘滅菌,以70%ethanol擦拭無菌操作抬面,并開啟無菌操作臺風(fēng)扇運(yùn)轉(zhuǎn)0分鐘后,才開始實(shí)驗(yàn)操作。每次操作只處理一株細(xì)胞株,且即使培養(yǎng)基相同亦不共享培養(yǎng)基,以避免失誤混淆或細(xì)胞間污染。實(shí)驗(yàn)完畢后,將實(shí)驗(yàn)物品帶出工作臺,以70%ethanol擦拭無菌操作抬面。操作間隔應(yīng)讓無菌操作臺運(yùn)轉(zhuǎn)0分鐘以上后,再進(jìn)行下一個細(xì)胞株之操作。
無菌操作工作區(qū)域應(yīng)保持清潔及寬敞,必要物品,例如試管架、吸管吸取器或吸管盒等可以暫時放置,其它實(shí)驗(yàn)用品用完即應(yīng)移出,以利于氣流之流通。實(shí)驗(yàn)用品以70%ethanol擦拭后才帶入無菌操作臺內(nèi)。實(shí)驗(yàn)操作應(yīng)在抬面之無菌區(qū)域,勿在邊緣之非無菌區(qū)域操作。
小心取用無菌之實(shí)驗(yàn)物品,避免造成污染。勿碰觸吸管尖頭部或是容器瓶口,亦不要在打開之容器正上方操作實(shí)驗(yàn)。容器打開后,以手夾住瓶蓋并握住瓶身,傾斜約45°角取用,盡量勿將瓶蓋蓋口朝上放置桌面。
工作人員應(yīng)注意自身之安全,須穿戴實(shí)驗(yàn)衣及手套后才進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。對于來自人類或是病毒感染之細(xì)胞株應(yīng)特別小心操作,并選擇適當(dāng)?shù)燃壷疅o菌操作臺(至少ClassⅡ)。操作過程中,應(yīng)避免引起aerosol之產(chǎn)生,小心毒性藥品,例如DMSO及TPA等,并避免尖銳針頭之傷害等。
公司其他類型產(chǎn)品信息:D0069 纖粘連蛋白/纖連蛋白(人血)/纖鏈蛋白/CIG/Fibronectin 細(xì)胞培養(yǎng)級,95% 毫克 86088-83-7 86088-83-7纖粘連蛋白 纖粘連蛋白 Fibronectin
5毫克
D0070 β-乳球蛋白/β-Lactoglobulin BR,90% 00毫克 9045-3- 9045-3-β-乳球蛋白 β-乳球蛋白 β-Lactoglobulin
克
抗生素類
000 /利發(fā)霉素/甲哌/力復(fù)平/利米定/3-[[(4-甲基--哌嗪基)亞氨基]甲基]-/Rifampicin USP級,99%,有害品 克 39-46- 39-46- Rifampicin
500克
000 /艾狄密新//Erythromycin USP級,88%,90u/mg,有害品 4-07-8 4-07-8 Erythromycin
500克
0003 /氟甲去氫----松//9-氟-,7,-三羥基-6-甲基(b,6a)-孕甾-,4-二烯-3,0-二--/Dexamethasone BR,99%,有害品 500毫克 國產(chǎn) CAS號:50-0- CAS號:50-0- Dexamethasone
0004 鋅/Bacitracin zinc USP級,40u/mg 350ku 405-89-6 405-89-6鋅 鋅 Bacitracin zinc
750ku
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