人乳腺導(dǎo)管瘤 具體操作
取出凍存管: 根據(jù)細(xì)胞凍存記錄按標(biāo)簽找到所需細(xì)胞的編號。
從液氮罐中取出細(xì)胞盒,取出所需的細(xì)胞,同時核對管外的編號。
初學(xué)者易犯錯誤:水浴鍋未預(yù)熱或者未預(yù)熱到37℃。
水浴鍋內(nèi)凍存管太多,導(dǎo)致傳熱不佳,使融化時間延長。
離心前忘記平衡,導(dǎo)致離心機(jī)損壞和細(xì)胞丟失。
一次復(fù)蘇細(xì)胞過多,忘記更換吸頭和吸管,導(dǎo)致細(xì)胞交叉污染。
實驗前準(zhǔn)備:將水浴鍋預(yù)熱至37℃
人乳腺導(dǎo)管瘤用75%酒精擦拭紫外線照射30min的超凈工作臺臺面。
在超凈工作臺中按次序擺放好消過毒的離心管、吸管、培養(yǎng)瓶 等。
迅速解凍:
迅速將凍存管投入到已經(jīng)預(yù)熱的水浴鍋中迅速解凍,并要不斷的搖動,使管中的液體迅速融化。
.約-2min后
凍存管內(nèi)液體*溶解,取出用酒精棉球擦拭凍存管的外壁,再拿入超凈臺內(nèi)。
平衡離心:用架盤天平平衡后,放入離心機(jī)中3000r/min 離心3min
制備細(xì)胞懸液:吸棄上清液。
向離心管內(nèi)加入0ml培養(yǎng)液,吹打制成細(xì)胞懸液。
活化與細(xì)胞復(fù)蘇 收到細(xì)胞株包裹時, 請檢查細(xì)胞株冷凍管是否有解凍情形, 若有請立即通知。細(xì)胞株請盡速開始培養(yǎng), 或立即冷凍保存(置于–70 °C, 隔夜后, 移到liq N2)。
細(xì)胞復(fù)蘇的原則-快速融化:必須將凍存在-96℃液氮中的細(xì)胞快速融化至37℃,使細(xì)胞外凍存時的冰晶迅速融化,避免冰晶緩慢融化時進(jìn)入細(xì)胞形成再結(jié)晶,對細(xì)胞造成損害。
細(xì)胞計數(shù):細(xì)胞濃度以5×05/ml為宜。
培養(yǎng)細(xì)胞將復(fù)合細(xì)胞計數(shù)要求的細(xì)胞懸液分裝入培養(yǎng)瓶內(nèi),將培養(yǎng)瓶放入37℃和5%CO2的培養(yǎng)箱內(nèi)2-4小時(或者24-48小時)后換液繼續(xù)培養(yǎng)培養(yǎng),換液的時間由細(xì)胞情況而定。
公司其他銷量大產(chǎn)品信息:003 γ-環(huán)糊精/γ-Cyclodextrin 高純,98% 7465-86-0 7465-86-0γ-環(huán)糊精 γ-環(huán)糊精 γ-Cyclodextrin
004 D-果糖/D-左旋糖/果糖/ D-(-)-果糖/D-阿拉伯型已-糖/水果糖/D-Fructose 高純,99% 57-48-7 57-48-7D-果糖 D-果糖/D-左旋糖 D-Fructose 500克
005 D-果糖-6-磷suan"二鈉/6-磷suan"果糖二鈉/F6P 生物技術(shù)級,98% 50毫克 677-86-6 677-86-6D-果糖-6-磷suan"二鈉 D-果糖-6-磷suan"二鈉 F6P
克
005- D-果糖-,6-二磷suan"三鈉/,6-二磷suan"果糖三鈉鹽/FDP 高純,98% 克 38099-8-0 38099-8-0D-果糖-,6-二磷suan"三鈉 D-果糖-,6-二磷suan"三鈉 FDP
超純,98% 克
006 D-氨基半乳糖鹽suan"鹽/D-半乳糖胺鹽suan"鹽/-氨基--脫氧-D-半乳糖鹽suan"鹽/D-軟骨糖胺鹽suan"鹽/D-Galactosamine HC 高純,98% 克 77-03-8 77-03-8D-氨基半乳糖鹽suan"鹽 D-氨基半乳糖鹽suan"鹽 D-Galactosamine HC
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