大鼠小腸隱窩上皮細(xì)胞具體操作
取出凍存管: 根據(jù)細(xì)胞凍存記錄按標(biāo)簽找到所需細(xì)胞的編號。
從液氮罐中取出細(xì)胞盒,取出所需的細(xì)胞,同時核對管外的編號。
初學(xué)者易犯錯誤:水浴鍋未預(yù)熱或者未預(yù)熱到37℃。
水浴鍋內(nèi)凍存管太多,導(dǎo)致傳熱不佳,使融化時間延長。
離心前忘記平衡,導(dǎo)致離心機(jī)損壞和細(xì)胞丟失。
一次復(fù)蘇細(xì)胞過多,忘記更換吸頭和吸管,導(dǎo)致細(xì)胞交叉污染。
實驗前準(zhǔn)備:將水浴鍋預(yù)熱至37℃
大鼠小腸隱窩上皮細(xì)胞用75%酒精擦拭紫外線照射30min的超凈工作臺臺面。
在超凈工作臺中按次序擺放好消過毒的離心管、吸管、培養(yǎng)瓶 等。
迅速解凍:
迅速將凍存管投入到已經(jīng)預(yù)熱的水浴鍋中迅速解凍,并要不斷的搖動,使管中的液體迅速融化。
.約-2min后
凍存管內(nèi)液體*溶解,取出用酒精棉球擦拭凍存管的外壁,再拿入超凈臺內(nèi)。
平衡離心:用架盤天平平衡后,放入離心機(jī)中3000r/min 離心3min
制備細(xì)胞懸液:吸棄上清液。
向離心管內(nèi)加入0ml培養(yǎng)液,吹打制成細(xì)胞懸液。
活化與細(xì)胞復(fù)蘇 收到細(xì)胞株包裹時, 請檢查細(xì)胞株冷凍管是否有解凍情形, 若有請立即通知。細(xì)胞株請盡速開始培養(yǎng), 或立即冷凍保存(置于–70 °C, 隔夜后, 移到liq N2)。
細(xì)胞復(fù)蘇的原則-快速融化:必須將凍存在-96℃液氮中的細(xì)胞快速融化至37℃,使細(xì)胞外凍存時的冰晶迅速融化,避免冰晶緩慢融化時進(jìn)入細(xì)胞形成再結(jié)晶,對細(xì)胞造成損害。
細(xì)胞計數(shù):細(xì)胞濃度以5×05/ml為宜。
培養(yǎng)細(xì)胞將復(fù)合細(xì)胞計數(shù)要求的細(xì)胞懸液分裝入培養(yǎng)瓶內(nèi),將培養(yǎng)瓶放入37℃和5%CO2的培養(yǎng)箱內(nèi)2-4小時(或者24-48小時)后換液繼續(xù)培養(yǎng)培養(yǎng),換液的時間由細(xì)胞情況而定。
公司其他銷量大產(chǎn)品信息:05 香豆素/香豆內(nèi)酯/,- 并哌哢/氧雜萘鄰-/鄰氧萘-/ 并鄰氧芑-/,- 并吡喃-/H-- 并吡喃---/Coumarin 高純,98%,有害品 500克 9-64-5 9-64-5香豆素 香豆素 Coumarin
053 suan"性偶氮紅/偶氮熒光桃紅/偶氮焰紅/suan"性紅/食品紅0/5-(乙?;被?4-羥基-3( 基偶氮)-,7-萘二磺suan"二鈉鹽/suan"性紅G/suan"性大紅G/偶氮螢光桃紅/Azophloxine FMP 3734-67-6 3734-67-6suan"性偶氮紅 suan"性偶氮紅 Azophloxine
054 赤蘚紅/藻紅/藻紅B/suan"性地衣紅/′,4′,5′,7′-四碘熒光素二鈉/四碘熒光素二鈉/藻紅B 鈉鹽/赤蘚紅B/潤滑劑X-/N,N'-亞乙基雙硬脂酰胺/Pyrosine B BS 643-68-0 643-68-0赤蘚紅 赤蘚紅 Pyrosine B
055 隱色結(jié)晶紫/無色結(jié)晶紫/隱性結(jié)晶紫/LCV BR,99%,&害品 國產(chǎn) 603-48-5 603-48-5隱色結(jié)晶紫 隱色結(jié)晶紫 LCV
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056 隱色孔雀石綠/無色孔雀石綠/隱性孔雀石綠/二(對二甲氨基 基) 基甲烷/Leucomalachite Green BR,&害品 國產(chǎn) 9-73-7 9-73-7隱色孔雀石綠 隱色孔雀石綠 eucomalachite Green
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分析標(biāo)準(zhǔn)品,98%,&害品 5毫克 國產(chǎn)
057 石炭suan"復(fù)紅/石炭suan"品紅/卡寶品紅/Carbol fuchsin BR,&害品 國產(chǎn) 497-4-4 497-4-4石炭suan"復(fù)紅 石炭suan"復(fù)紅 Carbol fuchsin
0克 國產(chǎn)
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