人角膜細(xì)胞具體操作
取出凍存管: 根據(jù)細(xì)胞凍存記錄按標(biāo)簽找到所需細(xì)胞的編號。
從液氮罐中取出細(xì)胞盒,取出所需的細(xì)胞,同時核對管外的編號。
初學(xué)者易犯錯誤:水浴鍋未預(yù)熱或者未預(yù)熱到37℃。
水浴鍋內(nèi)凍存管太多,導(dǎo)致傳熱不佳,使融化時間延長。
離心前忘記平衡,導(dǎo)致離心機(jī)損壞和細(xì)胞丟失。
一次復(fù)蘇細(xì)胞過多,忘記更換吸頭和吸管,導(dǎo)致細(xì)胞交叉污染。
實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備:將水浴鍋預(yù)熱至37℃
人角膜細(xì)胞用75%酒精擦拭紫外線照射30min的超凈工作臺臺面。
在超凈工作臺中按次序擺放好消過毒的離心管、吸管、培養(yǎng)瓶 等。
迅速解凍:
迅速將凍存管投入到已經(jīng)預(yù)熱的水浴鍋中迅速解凍,并要不斷的搖動,使管中的液體迅速融化。
.約-2min后
凍存管內(nèi)液體*溶解,取出用酒精棉球擦拭凍存管的外壁,再拿入超凈臺內(nèi)。
平衡離心:用架盤天平平衡后,放入離心機(jī)中3000r/min 離心3min
制備細(xì)胞懸液:吸棄上清液。
向離心管內(nèi)加入0ml培養(yǎng)液,吹打制成細(xì)胞懸液。
活化與細(xì)胞復(fù)蘇 收到細(xì)胞株包裹時, 請檢查細(xì)胞株冷凍管是否有解凍情形, 若有請立即通知。細(xì)胞株請盡速開始培養(yǎng), 或立即冷凍保存(置于–70 °C, 隔夜后, 移到liq N2)。
細(xì)胞復(fù)蘇的原則-快速融化:必須將凍存在-96℃液氮中的細(xì)胞快速融化至37℃,使細(xì)胞外凍存時的冰晶迅速融化,避免冰晶緩慢融化時進(jìn)入細(xì)胞形成再結(jié)晶,對細(xì)胞造成損害。
細(xì)胞計(jì)數(shù):細(xì)胞濃度以5×05/ml為宜。
培養(yǎng)細(xì)胞將復(fù)合細(xì)胞計(jì)數(shù)要求的細(xì)胞懸液分裝入培養(yǎng)瓶內(nèi),將培養(yǎng)瓶放入37℃和5%CO2的培養(yǎng)箱內(nèi)2-4小時(或者24-48小時)后換液繼續(xù)培養(yǎng)培養(yǎng),換液的時間由細(xì)胞情況而定。
公司其他銷量大產(chǎn)品信息: 0308 尿素瓊脂基礎(chǔ)(pH7.) 50g/瓶 用于細(xì)菌尿素酶試驗(yàn)
0306 40%尿素溶液 5ml×0 支/盒 每支用于 00ml 0308 中
033 尿素瓊脂斜面(pH7.) 4ml×0 支/盒 用于細(xì)菌尿素酶試驗(yàn)
0307 三糖鐵(TSI)瓊脂 50g/瓶 用于細(xì)菌生化試驗(yàn)
03 三糖鐵(TSI)瓊脂斜面 4ml×0 支/盒 用于細(xì)菌生化試驗(yàn)
4 單核細(xì)胞增生李斯特氏菌套裝生化鑒定管 種(SN084) 支/套×0 套 含過氧化氫酶、動力、硝酸鹽、葡萄糖、MR、VP、鼠李糖、木糖、 、麥芽糖、七葉苷、尿素酶
"SN/T 0475—95 糞鏈球菌群檢驗(yàn)"
500 無菌采樣袋/均質(zhì)袋 00 個/袋 用于采集、儲存、運(yùn)輸及均質(zhì)樣品
3004 無菌生理鹽水 5ml×0 瓶/箱 含 0.85%NaCl,用于樣品稀釋
0907 *葡萄糖肉湯 50g/瓶 用于糞鏈球菌增菌
0908 Pfizer 腸球菌選擇性瓊脂(PSE 瓊脂) 50g/瓶 用于糞鏈球菌選擇性分離
0904 腦-心浸萃液態(tài)培養(yǎng)基 50g/瓶 用于糞鏈球菌確證
0905 腦-心浸萃瓊脂培養(yǎng)基 50g/瓶 用于糞鏈球菌確證
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